中药制剂的理化鉴别.pptVIP

五、应用实例（P59） （一）元胡止痛片 （二）五味麝香丸 （三）热炎宁颗粒 第五节 薄层色谱鉴别法（Thin Layer Chromatography TLC） 一、原理 基于相同物质在同一的色谱条件下，表现出相同的色谱行为这一基本规律，在同一块薄层板上点加供试品和对照物，在相同条件下展开，显色检出色谱斑点后，将所得供试品与对照物的色谱图进行对比分析，从而对药品进行定性鉴别。 二、特点 （一）简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功能，且采用共薄层对照分析法，故专属性亦较强。 （二）系统适用性试验。(05版药典新增) 1.检测灵敏度 2.分离度 3.重复性 1.检测灵敏度 主要用于限量检查.采用供试品溶液和对照品溶液与稀释若干倍（10倍）的对照品溶液在规定的色谱条件下，于同一块薄层板上点样、展开、检视，后者应显示清晰的斑点。 2.分离度 用于鉴别时，对照品溶液与供试品溶液中相应的主斑点，应显示两个清晰分离的斑点。用于限量检查和含量测定时，要求定量峰与相邻峰之间有较好的分离度，除另有规定外，分离度应大于1.0。 分离度（R）的计算公式为： R=2(d2-d1)/W1+W2 式中 d1为相邻两峰中后一峰与原点的距离； d2为相邻两峰中前一峰与原点的距离； W1 及W2为相邻两峰各自的峰宽； A B W1 W2 d1 d2 3.重复性 主要用于含量测定.即同一供试品溶液在同一块薄层板上平行点样的待测成分的峰面积测量值的相对标准偏差(RSD)应不大于3.0%；需显色后测量的相对标准偏差应不大于5.0%。 （三）对照物的设置 对照物分为对照品（主要为有效成分和特征性成分的单体）、对照药材和对照提取物三种。 对照物的设置有四种方式： ①设置一种或数种对照品 ②设置对照提取物 ③设置一种或数种对照药材 ④同时设置对照品和对照药材(“双对照”)，它要求样品色谱图中的主斑点应与对照品和对照药材色谱图中的有关斑点相一致，从而大大提高了薄层色谱鉴别法的专属性和整体性，可有效地检出药品是否使用了假冒药材. （四）TLC已广泛用于中药材及其制剂的检验，成为中药鉴别的重要方法和鲜明特色。 （五）中国药典大多数品种采用硅胶薄层色谱法，少数使用聚酰胺薄层色谱法和氧化铝色谱法。 薄层色谱法还可用于药品的杂质检查和含量测定。 三、影响薄层色谱鉴别的主要因素 影响因素较多，例如供试液的净化程度，吸附剂的性能和薄层板的质量、点样（原点）的质量、展开剂的组成和饱和情况、对照品的纯度、展开的距离、相对湿度和温度等。重点介绍展开剂、相对湿度、温度和pH值的影响。 四、仪器与材料 （一）薄层板 1.市售薄层板（亦称预制薄层板） 除另有规定外，一般要求使用市售薄层板。市售薄层板分普通薄层板和高效薄层板两种。常用的有硅胶薄层板、硅胶GF254薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等。 2.自制薄层板 在保证色谱质量的前提下，如需对薄层板进行处理和化学改性，以适应供试品分离的要求时，也可用实验室自制的薄层板，除另有规定外，玻板可用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm、20cm×20cm不同规格的，最常用的固定相有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、硅胶HF254等。其颗粒大小，一般要求直径为10~40μm。薄层板采用湿法制备，即使用涂布器将制好的固定相糊均匀涂布于玻板上。所用涂布器应能使固定相在玻板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。涂布器有手动、半自动、全自动等类型。 不同规格的薄层板 铺制薄层板 （二）点样器材 为了增强药品定性鉴别的可比性，中国药典规定采用定量点样。最常用的是微升毛细管（定容毛细管），为了提高点样效率和质量，还可用点样辅助设备，如点样支架、半自动或自动点样器。 （三）展开容器 应使用专用的展开缸，展开缸有水平式及直立式两种类型。上行展开一般使用直立展开缸，它又分为平底式和双槽式，双槽展开缸具有节省溶剂、便于预平衡、可控制展开箱内的湿度等优点。 展开缸盖子应能密闭，体积应与薄层板大小相适应。不能用生物标本缸等其它玻璃器皿作为展开缸，否则影响展开质量。 全自动点样仪 微升毛细管 双槽展开缸 （四）显色（检视）装置 展开后的薄层板，一般