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微生物检验9的学习资料第1页/共64页第2页/共64页不发酵革兰阴性杆菌概念：一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。第3页/共64页不发酵革兰阴性杆菌黄杆菌属 (Flavobacterium)艾肯菌属 (Eikenella)土壤杆菌属 (Agrobacterium)黄单胞菌属 (Xanthomonas)丛毛单胞菌属 (Comamonas)假单胞菌属 (Pseudomonas) 产碱杆菌属 (Alcaligenes)不动杆菌属 (Acinetobacter)莫拉菌属 (Moraxella)无色杆菌属 (Achromobacter)金氏杆菌属 (Kingella)第4页/共64页不发酵革兰阴性杆菌常见不发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定试验假单胞菌属无色杆菌属黄杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属丛毛菌属莫拉菌属氧化酶+++/--+++/-O/F试验O/-OOO/----动力+/-+/-+/--++-注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。第5页/共64页－不动杆菌属OX－－－摩拉氏菌属葡萄糖产酸+黄色素++黄杆菌属动力－嗜麦芽窄食单胞菌 非发酵菌－产碱杆菌属OX葡萄糖产酸+－无色杆菌属尿素+端鞭毛+土壤杆菌属++假单胞菌属常见不发酵菌的鉴定双岐索引第6页/共64页 第 一节 假单胞菌属 (Pseudomonas) 一、 概述　1. 分类　2. 临床意义　3. 微生物特性 　4.微生物检验 (1)检验程序 (2)鉴定 (3)药物敏感性试验(Antibacterial Susceptibility Test) 第7页/共64页1.分类假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定rRNA同源群有关的种一群需氧、不发酵葡萄糖无芽胞，有鞭毛氧化酶阳性的革兰阴性杆菌多为条件致病菌第8页/共64页2.临床意义假单胞菌属分布广泛，人类不发酵菌感染中，假单胞菌占70％～80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌等第9页/共64页3.微生物特性革兰阴性、无芽胞、专性需氧有端鞭毛或丛鞭毛生长温度范围广，最适生长温度为35℃产生各种水溶性色素：绿脓素、脓玉红素、荧光素、脓褐素对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药 第10页/共64页4.微生物检验检验程序 鉴定药物敏感性试验按NCCLS（National Committee for Clinical Laboratory Standards）推荐，分为4组：A，B，C，D　第11页/共64页二、铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)1.临床意义：铜绿假单胞菌在自然界分布较为广泛，因此很容易污染器械而造成感染机会　第12页/共64页致病机制 粘附素：粘附 结构成分 多糖似荚膜物质 毒素 内毒素：LPS毒力因子 外毒素：A 阻止真核细胞蛋白质合成 S 干扰吞噬杀菌作用 绿脓素：具有氧化还原活性，催化超氧化物和 过氧化氢产生有毒基团 酶类 弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶（Las-A） 降解弹性 锌金属蛋白酶（Las-B）蛋白 磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂，损伤组织细胞第13页/共64页2.生物学特性革兰阴性，长短不一单鞭毛生长温度25～42℃氧化酶阳性还原硝酸盐、分解尿素、精氨酸酶阳性第14页/共64页3.微生物检验（检验程序）（1）分离培养与鉴定： 标本可接种于血琼脂平板培养基和选 择性培养基 鉴定根据镜下特征、菌落形态、生化 反应等第15页/共64页铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味可产生多种色素： 荧光素与绿脓素第16页/共64页铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)绿脓素第17页/共64页铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)（2）抗原检测：血清学分型、噬菌体分型（3）核酸检测：质粒指纹图分析、脉冲场凝胶电泳分析（PFGE pulsed field gel electrophoresis）、基因芯片、PCR技术、16SrDNA分型鉴定技术第18页/共64页铜绿假单胞菌（P. aeruginosa) 检验结果分析与报告： 诊断一定要与临床表现相结合 治疗过程中，3－4天后重复药敏测试第19页/共64页铜绿假单胞菌（P. aeruginosa)耐药机制：①产酶：金属酶，OXA酶②外膜蛋白的改变（Outer membrane proteins，OMP）为主要机制③主动泵出机制：对喹诺酮类，　　MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj④整合子：1类，3类 第20页/共64页三、马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔