DB21_T 3052-2018口蹄疫病毒A型抗体快速检测方法 镧系荧光免疫层析法.pdfVIP

ICS 11.220 B 41 备案号：62088-2019 DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3052—2018 口蹄疫病毒A 型抗体快速检测方法 镧系荧光免疫层析法 The Rapid Detection Methods for Antibodies to Foot and Mouth Disease Virus Type A Lanthanide Fluorescence Immunochromatographic Assay DB21/T 3052—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1给出的规则起草。 本标准由辽宁省畜牧兽医局提出。 本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。 本标准起草单位：辽宁省动物医学研究院、辽宁省动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人：周晨阳、申贯男、杨本勇、杨洺扬、梁乔、李蓉、张健、孙世宇。 II DB21/T 3052—2018 口蹄疫病毒A 型抗体快速检测方法 镧系荧光免疫层析法 1 范围 本标准规定了以镧系荧光免疫层析法检测牛、羊、猪血清中的口蹄疫病毒A型抗体的检测方法。 本标准适用于牛、羊、猪血清中口蹄疫病毒A型抗体水平的快速检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 原理 采用免疫夹心法和镧系荧光免疫层析法相结合技术，检测动物血清样本中的口蹄疫病毒A型抗体。 将镧系纳米荧光微球作荧光示踪物标记口蹄疫病毒A型重组抗原，血清样本抗体与镧系纳米荧光微球标 记的口蹄疫病毒A型重组抗原接触形成复合物后，继续与硝酸纤维素膜上检测线包被的口蹄疫病毒A型重 组抗原发生反应，形成抗原-抗体-荧光微球标记抗原免疫复合物，最后用荧光检测仪读取检测卡上的荧 光信号。 4 仪器与试剂 4.1 仪器 4.1.1 镧系荧光检测仪：激发波长为400 nm±20 nm，检测波长为615 nm±10 nm。 4.1.2 单道可调移液器：10 μL ～100 μL，0.5 μL ～10 μL。 4.1.3 分析天平：感量0.0001 g。 4.1.4 离心机。 4.1.5 冰箱：2 ℃～8 ℃，-20 ℃。 4.2 试剂 4.2.1 样品稀释液：见附录A。 4.2.2 口蹄疫病毒A 型抗体荧光免疫试剂卡：镧系荧光微球标记的口蹄疫病毒A 型重组抗原和鸡IgY 埋置在标记物垫内；硝酸纤维膜上的测试线（T）和参考线（C）分别包被口蹄疫病毒A 型重组抗原和羊 1 DB21/T 3052—2018 抗鸡IgY 的IgG。（见图1） 图1 口蹄疫病毒A 型抗体镧系荧光免疫层析卡示意图 5 样品采集与处理 5.1 样品的采集 应按照NY/T 541中的规定进行，并做好安全防护。按常规方法用干燥、洁净的离心管或适当容器采 集3 mL～5 mL血液。 5.2 样品的处理 血液样本用离心机3000 r/min离心3 m