凝血酶原时间测定.docxVIP

凝血酶原时间（PT）测定 （分析仪器法） 编号: 某某人民医院 检验科临检室 凝血酶原时间（PT） 测定 （分析仪器法）  版本:1 页数:共 5 页 实验原理：凝固法 确定量的血浆（50 微升）样本经一定时间加温后，加入 PT 试剂，采用波长 660nm 的光照射样本，凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定，然后通过标准曲线求出凝血酶原时间，再通过参数计算得出凝血酶原活动度及 INR 值。 标本采集 早晨空腹采血(空腹 12 小时左右),静脉采血。 3.8％(w/v)枸椽酸钠 0.2ml+静脉血 1.8ml,混匀。 标本存放 1 小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过 2 小时,2～8℃保存不超过 4 小时， 长时间保存需在冰冻条件下，（-70℃不超过 6 个月）,只能冻融 1 次，在 37℃迅速解冻，以减低凝血因子的消耗，解冻后立即测试。 标本运输：低温条件下运输。 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。 实验材料: 德国 Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂,每瓶加 4ml 蒸馏水溶解(40 人份),未开封试剂 2～8℃贮存到说明书上有效期，复溶试剂 2～8℃保存不超过 5 天。 Dade Control 质控血浆.用蒸馏水 1ml 溶解后放置 30 分钟,才能使用或分装。复溶后,室温保 存 2 小时,2～8℃4 小时。 仪器设备: 仪器名称: Sysmex CA-1500 全自动血液凝固分析仪 仪器厂家:日本 Sysmex 公司 仪器型号:Sysmex CA-1500 仪器技术参数: 速度: 最快检测速度 180 测试/小时,组合检测约 140 测试/小时 试剂位:36 个,具冷藏功能。 样本位:50 个,可自动连续添加。 仪器校准程序: 校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果等情况时,必须进行校准。 校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行) 操作步骤: 检查前准备: 清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。 添加足够反应杯(不能超出警告线)。 添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。 开机 先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约 15 分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”, 表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。 输入工作清单: 从主菜单选 Work List→出现第一架样本工作清单输入画面,选 ID NO Entry 输入第一个样本号→按相应实验项目名称键 PT,并同时输入此标本的其他测试项目,若选“凝血四项（PT、APTT、Fbg、TT）”，可按 Profile #1 组合选项选择，选中项目相应位置标记为“○”，选完项目后按 ENTER 确认，要删除某项目时只需按该项目（按键如PT○变为 PT-）即可，→用↑ ↓键，同样输入其他标本编号项目。（快速输入可用 Repeat 键，输入重复标本数，复制同样项目的输入。 放置样本 按 8.3 所设好的工作清单顺序将离心分离好的样本放置于样本架上,并按顺序把样本架排列于 Sampler 进样器右边位置(最多同时放 5 架共 50 个样本) 按 Start 键开始测定. 盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正上方显示“Ready”)按 Start 键,进样开始,→测定进行,仪器显示为“Analying”(被选择项目背景变为“◎”，此时可重复 8.3,8.4,继续输入其他架样本工作清单,按 Rigester,继续确认测试任务,添加样本架继续测试,→测定完成, 测定项目背景变为“●”，打印机打印出测定结果，所有测定清单完成，系统恢复“Ready”状态。 每日维护:完成每日的测定后,关机前维护。 冲冼针 Rinse Probe 清空废液瓶,和已使用过的反应杯。 将试剂架连用试剂放入冰箱。 关机:先关主机,再关打印机。 检验结果的判断与分析: 仪器测定 PT 的线性范围在 5-600 秒,测定完成后仪器显示 PT 秒数、PT 活动度、INR 值等参数。若不能对参数进行正确计算,将出现下列信息: ﹡﹡﹡.﹡出现错误,不能得到分析数据 ˉˉˉ.ˉ不能计算参数 ＋＋＋.＋数值超出线性范围. 仪器设定 PT 参考范围在 10-14 秒,如果得不到一个正常数值,在数据的左侧将出现下列标记: ﹡ 出现错误信息 数据低于可报告的低限 数据高于可报告的高限 质量控制:每批样本同时测定两个浓度水平(高值和正常值)的质控品,以 2S 为警告限,3S 为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则详见室内质控作业指导书。 临床意义：PT 是用于筛查外源性凝血系统（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ）及口服抗凝药物剂量（如华发 令、双香豆素等）的检测项目