细菌性腹泻标准化检测及相关进展 山东省立医院医学检验部.pptxVIP

细菌性腹泻标准化检测及相关进展张仁峰微生物科山东省立医院医学检验部 基本概念腹泻排便次数明显超过平日习惯的频率，粪质稀薄，水分增加，或含未消化的食物、脓血或粘液，常伴有排便紧迫感、肛门不适、失禁等症状。感染性腹泻由细菌、病毒、真菌及寄生虫感染引起肠道炎症所致的腹泻。除霍乱、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻称为狭义上的感染性腹泻，为《中华人民共和国传染病防治法》中规定的丙类传染病。 感染性腹泻常见病原体细菌病毒 真菌/寄生虫? 霍乱弧菌? 沙门菌轮状病毒腺病毒? 志贺菌隐孢子菌? 肠致泄性大肠埃希菌? 副溶血弧菌蓝氏贾第鞭毛虫溶组织内阿米巴星状病毒诺如病毒? 空肠弯曲菌? 小肠结肠炎耶尔森氏菌? 金黄色葡萄球菌? 艰难梭菌 标本采集粪便标本病人在干燥清洁便盆（避免使用坐式或蹲式马桶）内自然排便，用无菌竹签挑取大便中异常部分（有黏液、脓液或血液的部分）；液体粪便取絮状物放入无菌盒中送检。普通细菌培养粪便标本宜放入运送培养基送检。直肠拭子对于患有腹泻但暂时没有大便产生的患者、婴幼儿，可采用直肠拭子进行检测。采集方法：用无菌拭子蘸取生理盐水湿润，由肛门插入6-7cm，轻轻在直肠内旋动取大便少许，将拭子插入运输培养基加盖封口送检。 注意事项n尽可能在抗生素应用之前采集标本。n所挑取的粪便标本不应接触其他部位（如便盆），样本中不能混有尿液及其他异物，采集过程应尽量无菌操作。n不应用厕纸收集粪便。n肠炎及发热病人建议做血培养。n伤寒沙门菌感染时骨髓培养阳性率高于血培养。 标本运送如新鲜粪便标本不是通过运输培养基送检，标本应在采集后立即送检，不应超过2h；若新鲜粪便是通过运输培养基送检，标本可在冰箱4℃保存（用于艰难梭菌培养标本除外），24h内送到实验室。该培养基常用于肠道病原菌的采集、运送和保存。成分：琼脂凝固剂氯化钠和氯化钙 维持渗透压磷酸氢二钠硫乙醇酸钠缓冲剂抑制氧化提供还原环境在28℃条件下，霍乱弧菌在此培养基上可存活22天；沙门菌和志贺菌可存活49天。 粪便病原菌检测流程观察粪便性状，有无脓液、黏液和血液常规筛查(门诊患者)加做特殊筛查(根据临床症状)弯曲菌(儿童)在医院住院72h;接受抗生素治疗：医院感染培养基：培养基：CCDASkirrow弱选择性：麦康凯或中国蓝强选择性：沙门志贺琼脂(SS)或XLD增菌肉汤：亚硒酸盐煌绿或革兰阴性杆菌肉汤培养基(42度微需氧)CCFACDIF毒素检测亚硒酸盐煌绿及革兰阴性杆菌肉汤培养基为非常规使用，建议当检测少量沙门和志贺菌时(如培养接触腹泻患者的职业危险人群和食品服务人员的粪便)使用。挑取可疑菌落，进行鉴定和药敏试验报告结果中华人民共和国卫生行业标准 WS/T 498-2017 沙门菌/志贺菌鉴定 沙门菌/志贺菌鉴定大便眼分泌物 沙门菌/志贺菌鉴定初步生化鉴定血清学分型：抗血清凝集试验参照说明书操作，直接挑取纯菌落与血清凝集，混匀抗血清制剂和菌落，搅拌1min左右，观察有无凝集；可将生理盐水与等量抗血清制剂混匀作为阴性对照。 沙门菌/志贺菌药敏药敏报告注意事项：—－应选择性报告药敏结果，临床不需常规抗生素治疗，但以下情况除外：l 临床 医生要求l 患者为播散性感染（尿、血或其它无菌体液培养为阳性）l 伤寒沙门菌感染l 某些免疫缺陷患者药敏报告：l 仅肠内感染时，报告氨苄西林、甲氧苄啶－磺胺甲噁唑和奎诺酮类药敏结果。l 若发生沙门菌肠道外感染，同时报告一种三代头孢菌素和氯霉素结果。l 沙门菌和志贺菌不报告第一、二代头孢菌素和氨基糖苷类药敏结果。l 由于奎诺酮类药物抑制骨骼生长，14岁以下儿童不选用奎诺酮类。 肠杆菌科细菌喹诺酮类的折点环丙沙星和左氟沙星对于肠杆菌（非沙门菌）的折点更新2018 CLSIM100 28thInterpretive Categories and ZoneDiameter Breakpoints, nearest whole mmInterpretive Categories and MICBreakpoints,μg/mLTest/Rep Antimicro Diskort Group bial Agent ContentCommentsSSDDIRSSDDIRQUINOLONES AND FLUOROQUINOLONES for Enterobacteriaceae except Salmonella spp. (Please refer to Glossary I.)CiprofloxacinBB5 μg5 μg≥ 21≥ 17–16–2014–16≤ 15≤ 13≤ 1≤ 2––24≥ 4≥ 8LevofloxacinInterpretive Categories and ZoneDiameter Breakpoints, nearest w