肿瘤部位光敏剂浓度检测.pptVIP

线性关系理论模型一 （这里给出理想检测时吸收激励光与激发荧光之间的关系，未考虑肿瘤细胞对激励光的散射、吸收、收集效率及肿瘤形状等因素） （1） （2） . . 线性关系物理模型二： 单一波长激励下光敏剂荧光相对与自体荧光的相对强度与光敏剂浓度线性关系。 在 波长激发下的公式关系 （4） （5） （6-1） （6-2） . . 考虑实际测量光谱值并非理论真实值，则定义如下关系式： （7） 则（7）式可改写为： （8） 上式中，N/R被认为待测荧光组织及返回激发光产生的背景噪声。 物理模型三：双波长激励下可消去噪声对线性关系的影响。 同理另一个波长 激励下 （9） . . (8)式与(9)式相减： （10） 令 则有 （11） 当待测肿瘤细胞浓度确定时， 为常量。 . . 光谱分析实验研究 实验方案： 采用荧光质量分析仪对正常细胞、PSD007孵化肿瘤细胞、正常细胞荧光光谱进行检测。 正常细胞：大鼠的脾脏白细胞；肿瘤细胞:LG12 实验内容： 确定细胞自体荧光、PSD007光敏剂荧光、ALA光敏剂荧光特征峰的位置，对激发光源波长进行指导。 . . PSD007吸收光谱测量结果 No. 波长(nm) 吸收值 1 619.50 0.275 2 568.00 0.560 3 540.00 0.629 4 505.50 0.852 5 405.00 3.456 6 360.00 4.039 7 352.00 4.039 8 338.00 3.914 . . 405nm激发下正常组织细胞荧光谱 . . 400nm激发下肿瘤+PSD007光敏剂荧光谱 . . 635nm激励下未发现荧光信号 . . 细胞实验研究-理想定标?离体细胞定标 实验方案： 激发光源：405nm连续激光器、荧光质量分析仪 待测样品：纯不同浓度PSD007、孵化白血病肿瘤细胞 光线探头：平头多纤芯NA=0.22医用光纤 光谱仪：USB400、tristan光纤光谱仪（300-1000nm） 实验内容： 找到合适的光纤光谱仪积分时间。 调节光纤探头位置，找到距离待测样品的合适位置。 测量不同浓度下光敏剂荧光相对强度。 激光激励与荧光质量分析仪两种方法下测量结果进行对比。 . . 荧光质量分析仪获得不同浓度PSD007光敏剂测量结果 . . 荧光特征峰614nm处相对强度与光敏剂浓度之间线性关系 浓度范围0.019ug/ml-5ug/ml 浓度范围0.019ug/ml-0.625ug/ml 理想定标线性关系曲线——荧光质量分析仪 . . PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——低浓度 405nm光源激发下不同孵化浓度肿瘤细胞光敏剂荧光强度 405nm光源激发下肿瘤细胞裂解后光敏剂荧光强度 . . 裂解前激发肿瘤细胞获得光敏剂荧光强度（高浓度孵化） 裂解后激发纯光敏剂荧光强度（高浓度孵化） PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——高浓度 . . 肿瘤部位光敏剂浓度检测 新技术讲座 . . 一 课题背景及研究目的和意义 二 国内外研究状况及分析 三 研究思路及方法 四实验中发现的问题 . . 光动力学疗法（PDT）具有组织选择性好、对微血管组织的损伤作用强、全身副反应少等特点[1,2]。 PDT治疗：将某种外源性光敏物质注射入生物组织中，在激励光源照射下，光敏物质吸收光子能量后，由基态变成激发态，之后又退激发并返回基态的过程中生成大量活性氧物质 (ROS)，其中最主要的是单线态氧(1O2)，1O2是一种光毒性物质，能与多种生物大分子相互作用，损伤细胞结构或影响细胞功能，从而对病变组织产生治疗作用。 光动力学疗法有望克服传统诊疗方法的缺点和不足，为癌症的治疗提供了新的途径和可能，由此可见，对其诊疗癌症的研究是非常必要的[3]。 在临床上有一定的治疗效果，但治疗剂量受到光敏剂浓度的影响，所以在治疗前需要对光敏剂浓度给予定量检测。 课题背景 . . * 研究目的和意义 经过归纳分析提出：激光、氧和光敏剂是影响光动力学疗法的生物学效应的三要素[4,5]，它们之间的量效关系相当复杂[6]，治疗过程中靶组织内光敏剂的含量是影响光动力反应效果的重要因素[7]。 不同的患者药代动力学同，所以在PDT治疗前需要实际测量每一位患者肿瘤部位光敏剂含量[8-11]。考虑到，非接触式荧光光谱测量载体光敏剂浓度[12]区别传统的接触式的、耗时长的、破坏性的测量方式[13]，对载体动物实验以至于临床诊断及治疗有着非常重要的作用。载体测量光敏荧光光谱信号会受到测量的肿瘤的形状、生物组织的吸收和散射等影响[14,15]，导致测得的荧光强度不能精确地反应光敏剂浓度。 目前在光动力临床治疗中，光敏剂荧光诊断还处于离体测量的阶段，不能准确的获得临床载体光敏