(3.3.4)--其他形态检测方法.pptVIP

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细菌其他形态检测技术 知识目标:了解细菌其他染色技术的原理、方法、注意事项、临床意义。 任务目标 1、荧光染色 如金胺O荧光染色法(肺结核患者痰标本) 荧光染色:金胺O染液,染色10-15′,水洗,甩干 脱色:3%盐酸酒精脱色1-2′(至无黄色为止)水洗,甩干 复染:0.5%PP 1~3′,水洗,甩干 干后于暗视野显微镜下观察:抗酸菌呈黄绿色或黄色荧光。 注意事项:荧光染色后应在24小时内检查。 金胺O荧光染色法 2、特殊染色 如细菌的特殊构造(芽胞、鞭毛、荚膜等)以及白喉棒状杆菌的异染颗粒,需用上述以外的特殊染色方法,在以后的细菌各论中分别讲述。 周鞭毛(普通变形杆菌)×1000 改良Ryu法: 结果:菌体和鞭毛皆为紫色,菌体染色较鞭毛为深. 单鞭毛(洋葱伯克霍尔德菌)×1000 荚膜染色:大肠埃希菌(尿标本),×1000 结晶紫-硫酸铜染色结果:菌体及背景呈紫色,菌体周围有一圈淡紫色或无色的荚膜 芽胞染色:地衣芽胞杆菌,×1000 石炭酸复红法染色结果:芽胞呈红色,芽胞囊和菌体呈蓝色。 孔雀绿法染色结果:芽胞呈绿色,芽胞囊和菌体呈红色 芽胞染色:地衣芽胞杆菌,×1000 异染颗粒亚甲蓝染色结果:白喉棒杆菌,×1000 亚甲蓝染色法结果菌体呈淡蓝色,异染颗粒呈暗蓝色。 3、其他:拉丝试验 3%KOH + 待检菌→研磨,能拉起丝者为G-菌,拉不起者为G+菌。 本法与革兰染色法结果一致者达95%以上,可作为革兰染色法的一种补充,特别是多应用于着色不定的厌氧菌中。 拉丝试验 脑脊液中的新型隐球菌,×400 墨汁荚膜染色法: 结果观察,新型隐球菌可见宽厚透亮的荚膜,细胞壁明显,有时有出芽现象,背景为黑色 教学片制备 试热 本章小结 1.细菌形态学检查是临床细菌学检验常用且极其重要的方法,根据染色目的和方法不同分为染色和不染色检查两大类。 2.革兰染色是细菌最常用的染色方法,可将细菌分为两大类:G+(紫色),G—(红色),在普通光学显微镜下可观察细菌形态、大小、排列、染色性和某些特殊结构(荚膜、芽胞)。 3.细菌不染色标本检查法常用压滴法,用于观察细菌活力。 思考题 1. 在相同条件下,革兰阳性菌被染成紫色,而革兰阴性菌却被染成红色,请说明其原因,革兰染色的意义有哪些? 2. 叙述抗酸染色的原理、结果和意义。 谢谢!

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