(3.4.4)--复合生化反应.pptVIP

复合生化反应 知识目标：熟悉KIA、MIU生化反应的原理、方法及结果判断。 能力目标：能进行KIA、MIU的生化反应，并判断正确结果。 任务目标 一．克氏双糖铁（KIA）试验 乳糖的浓度为葡萄糖的10倍，若细菌只分解葡萄糖而不分解乳糖，在培养基深层中，氨基酸的降解作用不足以中和所形成的酸，故仍呈黄。因此，KIA斜面呈碱性，深层呈酸性反应，说明该菌只分解葡萄糖而不分解乳糖。 若细菌能分解乳糖则产生大量的酸，这些酸能中和斜面产生的碱，使整个培养基呈黄色。若细菌能分解培养基中含硫氨基酸，则可产生H2S，H2S与培养基中枸 橼酸铵铁起反应，产生不溶性的黑色硫化亚铁沉淀。 原理 KIA里面有哪几种底物？指示剂是什么？能够检测几种结果？ 作答 正常使用主观题需2.0以上版本雨课堂 采用斜面接种法，35℃培养18~24小时，观察结果。观察结果时我们用A表示产酸,K表示产碱,+表示产气或产硫化氢,-表示不产气或不产硫化氢,报告的顺序为斜面(A或K)/底层(A或K)/是否产气(+ -)/是否产硫化氢(+ -) 方法及结果 KIA反应结果 请写出以上4个KIA的结果 作答 正常使用主观题需2.0以上版本雨课堂 ①斜面酸性/底层酸性：葡萄糖和乳糖发酵，如大肠埃希菌、克雷伯茵属、肠杆菌属斜，图左一（发酵型,产气）AA+- ②斜面碱性/底层酸性：葡萄糖发酵，乳糖不发酵，如志贺菌，图左二（发酵型,不产气）KA-- 常见的KIA反应结果有如下几种： ③斜面碱性/底层酸性(黑色)：葡萄糖发酵、乳糖不发酵，产生H2S，如沙门菌、普通变形杆菌，图左三（产硫化氢）KA-+ ④不发酵糖类。图左四（产碱型）KK-- 常见的KIA反应结果有如下几种： 二、动力靛基质尿素酶（MIU）试验 动力靛基质(吲哚)尿素酶培养基中，除含200g/L尿素和酚磺酞指示剂外，其蛋白胨较原克利斯顿森尿素培养基高10倍，并制成半固体培养基，以便观察细菌的动力。由于蛋白胨中含有丰富的色氨酸，产生色氨酸酶的细菌可以水解色氨酸形成靛基质，当加人靛基质试剂后形成玫瑰吲哚。产生尿素酶的细菌将培养基中的尿素分解产碱，使酚磺酞指示剂显桃红色。因此，该试验可同时观察细菌动力、靛基质的产生和细菌分解尿素的情况。 原理 MIU的底物有哪几种？指示剂是什么？检测哪几种结果？ 作答 正常使用主观题需2.0以上版本雨课堂 取待检细菌穿刺接种到MIU培养基内，35℃培养18~24小时后，观察结果。接种线变宽、变模糊，培养基变混浊为动力试验阳性．当加人靛基质试剂后，试剂与培养基的接触界面形成玫瑰红色为靛基质试验阳性；培养基全部变成桃红色为尿素酶试验阳性。 方法及结果 请写出上面三个MIU的结果 作答 正常使用主观题需2.0以上版本雨课堂 我们按动力\吲哚\尿素的顺序来报告结果,+表示阳性,-表示阴性。 图左一的结果:如果动力为阴性,结果为--- 图左二动力为阳性,结果为+++ 图左三动力为阳性,那结果为++- 结果报告 大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－） 志贺菌KIA（K A－－）MIU（－－－） 伤寒沙门菌KIA（K A－＋）MIU（＋－－） 肺炎克雷伯菌KIA（A A＋＋ ）、MIU（－－＋） 杆菌肽实验 奥普托欣实验 能初步鉴别致病性肠道杆菌与非致病性肠道杆菌的试验是： 葡萄糖发酵试验 乳糖发酵试验 VP试验 甲基红试验 A B C D 提交 一试验菌在KIA上的24h内的反应为“斜面红色/底层黄色”，则可判断： 发酵葡萄糖，迟缓或不发酵乳糖 既发酵葡萄糖，又发酵乳糖 发酵乳糖，不发酵葡萄糖 葡萄糖和乳糖都不发酵 A B C D 提交 奥普托欣试验属于 碳水化合物代谢试验 蛋白质和氨基酸的代谢试验 呼吸酶类试验 鉴定细菌用的抑菌试验 A B C D 提交 谢谢!