影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策(职称论文资料).docVIP

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影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策(职称论文资料) 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策 1 1 电泳前准备的影响因素 2 2 电泳时的影响因素 6 3 电泳后的影响因素 7 文2:论影响酶联免疫吸附试验结果的常见因素及控制方法 7 1试剂的因素 7 2样本的因素 8 3操作中的因素 9 参考文摘引言: 11 原创性声明(模板) 12 文章致谢(模板) 13 正文 影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策(职称论文资料) 文1:影响血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验结果的常见因素及相应对策 The common facto and corresponding measures of affecting the experiment results of the cellulose acetate membrane electrophoresis of serum protein HE zhiying Medical College of Yanan Univeity, Shaanxi Province, Yanan 716000, China [Abstract] Cellulose acetate film electrophoresis is widely used in clinical examination and medical experimental teaching, but many facto affect the results. The analysis discussion is directed to the various facto in the experiment and concrete measures for improvement are put forward in order to obtain the ideal map for the analysis of the clinical examination and laboratory teaching. [Key words] Cellulose acetate membrane; Electrophoresis; Influencing facto; Countermeasure 醋酸纤维薄膜电泳是以醋酸纤维薄膜作支持物的一种区带电泳技术,因其有快速省时、分辨能力强、操作简单、成本低廉、透明后利于扫描定量及长期保持等优点,被广泛应用于血浆蛋白、脂蛋白、糖蛋白、核酸及其他生物大分子的分析检测,已成为医学和临床检验的常规技术,血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验也成为了生物化学实验课程必开的基础实验项目之一。但该实验影响因素很多,每个环节的失误都会对实验结果产生影响而得不到理想的图谱,并且还造成很大浪费。笔者结合多年的实验教学经验对影响本实验结果的常见因素进行分析探讨,并提出了相应的解决对策。现报道如下: 1 电泳前准备的影响因素 醋酸纤维薄膜的因素 醋酸纤维薄膜的选择 醋酸纤维薄膜如果厚度不一、粗面细孔不均、脆性不一,在电泳时会出现区带不均匀、白色斑点处蛋白质不泳动而影响图谱的效果[1]。对策:①购买知名度相对高的正规厂家生产的产品;②将干膜片漂浮于电极缓冲液表面,如漂浮20 s左右时,膜片出现白斑点或条纹,应舍去不用[2] 醋酸纤维薄膜的浸泡 由于醋酸纤维薄膜亲水性比较低,浸泡时间过短,不能保证膜片上有一定量的缓冲液,难以使其恢复原来多孔的网状结构,所以浸泡时间不少于30 min。浸泡时用镊子将纤维薄膜条粗面向下平稳放入缓冲液中,使其自然湿润沉下液面或用手轻摇装液外盒,不要用镊子、玻棒等器材按压纤维素薄膜沉下液面,也不要同时将多条纤维素薄膜一起放进缓冲液盒。 标本的因素 血清标本的新鲜度 不新鲜血清标本蛋白质电泳图谱α2与β之间可能会多出现一条粗而染色均匀的区带,也可能会出现电泳图谱区带不清晰,比较离散,甚至有拖尾现象[1]。有研究证明,在2~8℃冰箱保存血清标本,第1天与第2天标本中各蛋白质组分百分比变化无统计学意义,从第3天开始,标本中白蛋白百分比下降,α1-球蛋白、α2-球蛋白和β-球蛋白百分比上升均有统计学意义[3]。因此,必须使用新鲜的血清,如新采取血清标本不是马上用,则必须放4℃冰箱贮存保鲜,但时间最多不能超过48 h。 溶血标本 溶血标本中白蛋白降低,α2-球蛋白、β-球蛋白升高。严重溶血时可见α2、β球蛋白区带重叠,区带百分比增加[4],因此应采用清亮无溶血的血清标本。 点样标本的替代 有文献报道,在实验教学中用鸡

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