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银杏叶提取物抗肝纤维化作用的研究(职称论文资料) 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:银杏叶提取物抗肝纤维化作用的研究 1 1材料与方法 2 文2:复方中药抗肝纤维化的研究进展 5 1 肝纤维化的病因病机 6 2 复方中药抗肝纤维化的临床研究 6 3 复方中药抗肝纤维化的机理 8 参考文摘引言: 11 原创性声明(模板) 12 文章致谢(模板) 12 正文 银杏叶提取物抗肝纤维化作用的研究(职称论文资料) 文1:银杏叶提取物抗肝纤维化作用的研究 银杏叶提取物(Ginkgo Biloba extract,GbE)是从银杏科植物银杏的叶中分离纯化的提取物,主要成分为黄酮甙和银杏内酯,有清除氧自由基、抑制脂质过氧化、改善微循环等药理作用[1]。本实验采用CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型,以不同剂量的GbE进行干预,同时设具有益气养血、化瘀解毒、软坚散结功效,临床用于防治肝纤维化的有效复方中药制剂复方鳖甲软肝片为阳性对照,观察GbE的抗肝纤维化的作用。 1材料与方法 实验动物SD大鼠60只,雄性,清洁级,体重190~210g,由上海斯莱克实验动物有限公司提供,许可证号:SCXK(沪)2003-0003。 主要药品与试剂CCl4为上海凌峰化学试剂有限公司产品,批号050615;橄榄油为北京京都利德食品有限公司产品(西班牙百叶公司),批号:;GbE为西安中鑫生物技术有限公司,批号050118,其中黄酮苷%、银杏内酯%;复方鳖甲软肝片为内蒙古福瑞中蒙药科技股份有限公司产品,批号;丙氨酸氨基转移酶(ALT)批号557-27173-01、天冬氨酸转氨酶(AST)批号4704-23872-2A、碱性磷酸酶(ALP)批号6900-32207-01,上述3个试剂盒均为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品;HA、LN放免试剂盒均为北京北方生物技术研究所产品,批号均为。 主要实验仪器SN-695智能放射免疫γ测量仪为上海原子核研究所日环仪器厂生产,日立7020全自动生化仪为日本高新技术株式会社生产。 肝纤维化模型建立 CCl4以橄榄油配制成40%浓度(V/V),皮下注射/100g体重,每周2次,首次加倍,连续6周建立肝纤维化模型,正常组以等容量的橄榄油皮下注射。 实验分组及处理60只SD大鼠随机分成6组,每组10只,正常组每周2次用橄榄油皮下注射,同时每天灌服等容量的蒸馏水;模型组在造模同时每天灌服等容量的蒸馏水;GbE高、中、低剂量组在造模同时每天分别灌服GbE混悬液200mg/kg、100mg/kg、50mg/kg;复方鳖甲软肝片组在造模同时每天灌服复方鳖甲软肝片混悬液1g/kg,均连续6周。所有大鼠予以标准大鼠饲料喂养,自由饮水。末次给药当晚大鼠禁食不禁水,次日上午空腹用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉, 腹腔静脉取血,分离血清,-20℃保存待用,取肝右叶小块肝组织,用4%多聚甲醛固定,逐级酒精脱水,常规石蜡包埋用于病理检查。实验期间GbE中剂量组1只大鼠因灌胃针不慎刺破食管死亡。 指标检测与方法血清ALT、AST、ALP采用全自动生化仪测定;血清HA、LN采用放免法测定;肝组织病理学检查常规HE及Masson染色光镜下观察肝组织病理学变化,参照王泰龄[2]等制订的慢性肝炎炎症活动度及肝纤维化程度计分方案进行评分。 统计处理实验数据以均数±标准差( ±s)表示,使用软件进行统计学分析,以P有统计学意义。 2结果 对肝纤维化大鼠血清肝功能的影响模型组血清ALT、AST、ALP水平较正常组明显升高(P);见表1。 对肝纤维化大鼠血清HA、LN的影响模型组大鼠血清HA、LN含量较正常组明显升高(P),GbE高、中、低剂量组及鳖甲软肝片组血清HA、LN水平则较模型组明显降低(P、P);见表2。 对肝纤维化大鼠肝组织炎症及纤维化程度的影响HE及Masson染色光镜下观察发现:正常组大鼠肝组织结构正常,胶原着色仅见于血管壁;模型组大鼠出现明显脂肪变性,肝细胞坏死,炎细胞浸润,坏死区及汇管区纤维结缔组织增生形成细小的条索,纤维宽窄不一,呈星芒状向肝小叶内延伸;GbE高、中、低剂量和复方鳖甲软肝片干预后大鼠肝组织炎细胞浸润和纤维组织增生程度较模型组轻。模型组炎症程度计分和纤维化程度计分明显高于正常组(P),GbE高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织的炎症程度计分及纤维化程度计分均较模型组明显减轻(P,P)。各药物干预组之间差异无显著性(P>)。见表3。 3讨论 肝纤维化是各种不同致病因子引起的慢性肝病的共同病理基础,最终可以发展为肝硬化,甚至肝癌,严重危害人类健康,因此能否阻止或逆转肝纤维化是治疗慢性肝病的关键。肝纤维化的具体形成机制还未完全明了,目前认为主要是由于肝
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