HPLC色谱柱的种类.docxVIP

高效液相色谱柱大致可分为五类: 一、高效反相液相色谱柱 以 C18 为代表的高效反相液相色谱柱一直被描述为药物发现、开发、方法验证(validation)的心脏! 高效反相液相色谱柱也极其广泛应用在药物代谢及动力学、生命科学、医疗健康、生物分析检测、毒品和兴奋剂检测、食品安全分析、环境分析、军事、国土安全等领域! 高效反相液相色谱制备柱也是最重要的分离纯化技术之一! 无论是过去，现在和可预见的未来, 以球形 B 型硅胶(5um 或 3um)为材料骨架的高效反相液相色谱柱在实际应用中永远占有统治地位!常规 HPLC 方法的开发几乎总是从C18 作为出发点，反相色谱占了 80% 以上的应用。 过去数十年来, 无数努力集注于: 1) 改善硅胶的品质, 优化键合化学; 2)开发新颖的材料骨架替代硅胶。 十多年前, 使用有机硅材料取代无机硅材料作为起始原料生产球形硅胶代表一个划时代的革命! 生产的球形硅胶命名为 B 型球形硅胶。无机 A 型硅胶重金属含量很高, 硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等导致许多碱性化合物回收率低。球形 B 型硅胶重金属含量很低, 在非常大的程度上消除了 A 型无机硅胶表面若干位置严重酸化及螯合效应等问题。用 B 型球形硅胶合成高效液相色谱填料, 导致高效液相色谱柱产品质量有质的飞跃! 然而，另一方面，基于客户的大量反馈和我们对几乎所有色谱厂商产品的评估, 我们相信键合化学问题没有获得很好的解决。具体体现在: “纯粹”反相机理的键合相例如C18 和C8 市场上仍然是单功能，三功能和聚合物键合相鱼目混杂 。 键合相封端问题没有获得很好的解决, 一直是困扰色谱领域最大的问题! 迄今为止全部的尝试只获得有限的成功。 极性嵌入式(Polar embedded)键合相 极性嵌入式(Polar embedded)键合相是C18 高效反相液相色谱卫星群中最重要的产品, 是C18 和C8 键合相最重要的补充。 极性嵌入式(Polar embedded)键合相起源于 Supelco ABZ。Supelco ABZ 的键合方法是用aminopropyl 键合相和长链羧酸缩合反应形成一个 C16 酰胺。 那么市场上的极性嵌入式(Polar embedded)键合相群的主要问题是什么? 极性嵌入式键合相和所谓的水相 C18 主要问题是键合相泄漏, 键合相不稳定等。两者之间的内在差异是: 极性嵌入式键合相键合相泄漏和键合相不稳定等问题能够获得很好的解决, 但使用极性硅烷试剂封端的所谓的水相 C18 键合相键合相泄漏和键合相不稳定等问题是不可逆转的。 在类似C18 链长度的硅烷试剂中嵌入极性酰胺或酰酯, 使得键合相亲水, 在 100%水相条件下稳定。但按照类似 C18 的键合化学, 键合覆盖率低, 键合相不稳定。 Chrom-Matrix InnovationTM PEG 键合相是非常极性的产品, 但测试结果表明: PEG 键合相非常稳定, 在 LC-MS 测试中没有检测到泄漏。这一成功和我们在胶体与界面科学领域的长期经验帮助我们成功开发了新型催化条件下新的键合化学。加上超临界流体技术封 端, Chrom-Matrix InnovationTM 极性酰胺或酰酯键合相比那么市场上的极性嵌入式 (Polar embedded)键合相群稳定得多。色谱柱产品质量和寿命有质的飞跃! 即使这样, LC-MS 测试显示: Chrom-Matrix InnovationTM 极性酰胺或酰酯键合相仍然有非常低的泄漏。 无泄漏低孔和高比表面积C18 键合相等是小分子化合物分离纯化的终端保证! 制备型高效反相液相色谱柱, 制备型高效正相液相色谱柱, 制备型高效离子交换色谱柱和对应的闪光色谱(flash chromatograpy) 是小分子化合物分离纯化最重要的终端保证! 但是市场上大多数色谱产品和闪光色谱(flash chromatograpy)键合相有明显的泄漏。尽管泄漏在紫外可见检测器中是看不见的, LC-MS 信号非常明显! 最重要的是泄漏的硅烷实实在在洗脱到顾客的终端纯化产品中, 而且没有考虑在内。 Chrom-Matrix 公司成功地解决了上述所有问题! InnovationTM所有反相高效液相色谱产品都使用B 型球形硅胶合成, 使用最优化个性化合成工艺, 使用超临界流体封端, 使用 LC-MS/MS 和表面电荷滴定等多种独特技术配合多种色谱测试保证产品的品质和批次重现性。其中大部分产品 LC-MS/MS 测试无泄漏, 极性嵌入式(Polar embedded)键合相非常低的泄漏。 二、高效正相液相色谱柱 正相液相色谱是最早的色谱模式。直到现在, 合成后通过硅胶柱做进一步纯化仍然是有机化学家日常工作的一个重要