男科学实验室诊断进展.pptVIP

六、精浆生化的检测 精浆中的一些生化标志可反映男性附属性腺、附睾及睾丸生精功能等，有利于综合评价不育的发病原因和机制。 例如，柠檬酸、锌、镁、谷氨酰转肽酶和酸性磷酸酶可反映前列腺功能，其中的酸性磷酸酶检测已成为男科实验室的常规检查，常用磷酸苯二钠法； 果糖与前列腺素可反映精囊腺功能，常用间苯二酚法检测果糖； 游离左旋肉毒碱、甘油磷酸胆碱和α-葡糖苷酶可反映附睾功能。 第30页，共52页，编辑于2022年，星期五 精浆总α-葡糖苷酶检测中应注意3点 离心速度不同，精浆总α-葡糖苷酶活性有所差异 精浆总α-葡糖苷酶活性与禁欲时间的长短密切相关 精浆总α-葡糖苷酶活性的检测应进行质量控制 第31页，共52页，编辑于2022年，星期五 不同速度离心后的精浆中α葡糖苷酶水平 第32页，共52页，编辑于2022年，星期五 禁欲时间对精浆α葡糖苷酶的影响 Abstinence time (day) n Alpha-glucosidase (U/ml) Seminal plasma (1 000 g for 10 min) Seminal plasma (3 000 g for 15 min) 2 ~ 3 12 36.47±12.24 34.04±11.22 4 ~ 5 16 49.62±16.86* 47.73±17.37* 6 ~ 7 14 51.14±19.76* 46.76±17.70* 8 9 68.70±14.10*#△ 63.86±13.63*#△ 第33页，共52页，编辑于2022年，星期五 精浆果糖检测中应注意4点： ①果糖标准液配制后应放置2周后使用，而使用2周 后出现吸光度降低时应立即更换新的果糖标准液 ②离心速度不同精浆果糖浓度稍有差异 ③精液液化后应立即离心将精子和精浆分离，否则会影响精浆果糖检测结果 ④精浆果糖测定中应引入质量控制体系 第34页，共52页，编辑于2022年，星期五 果糖标准液吸光度的监测 第35页，共52页，编辑于2022年，星期五 精液 放置时间对果糖浓度的影响 Group n Fructose (mmol/L) 0 h 48 15.73±6.56 2 h 48 15.07±6.56a 4 h 48 14.73±6.51b,c 第36页，共52页，编辑于2022年，星期五 精浆稀释后放置时间对酸性磷酸酶活性的影响 随机选取10例精浆，1∶10 000稀释后立即检测ACP活性或稀释后放置30 min再次检测ACP活性，两者比较有极显著性差异（t ＝ 3.770，P ＝ 0.001）。 第37页，共52页，编辑于2022年，星期五 抑制素B被认为是男性精子发生的血清标志物。 成年男性血清中维持可检测的抑制素B水平需要生精细胞的存在，唯支持细胞综合征（SCO）男性血清抑制素B水平极低。 Brugo-Olmedo等认为血清抑制素B在预言非阻塞性无精子症病人的睾丸精子存在时比血清FSH更准确。 除此之外，抑制素B还可用于儿童隐睾、性早熟的诊断，监测放、化疗对男性生精功能的损伤等。 目前，抑制素B的检测通常使用双抗体夹心ELISA法。 第38页，共52页，编辑于2022年，星期五 七、精浆细胞因子的检测 精浆细胞因子由男性泌尿生殖道内的各种细胞分泌，包括转化生长因子（TGF）、表皮生长因子（EGF）、肿瘤坏死因子（TNF）、各种白细胞介素（IL）及某些可溶性受体等。目前认为，与男性不育有关的细胞因子主要有IL-6和IL-8，不育病人精浆中IL-6和IL-8水平明显高于生育力正常的男性。 测定IL-6和IL-8的方法有：生物学方法、分子生物学方法和免疫学方法，以免疫学方法多用，尤以ELISA和RIA常用。 第39页，共52页，编辑于2022年，星期五 八、精子发生相关基因的检测 与精子发生相关的基因很多，无精子病人的基因缺失均发生于Y染色体的长臂,主要位于Yq11.23中，而且并非是单一基因，可能含有整个基因大家族。 1996年，Vogt等人在更大范围对无精子、少精子病人进行了研究，认为在3个区域均存在AZF，分别为AZFa，AZFb，AZFc，对这些病人睾丸活检发现，睾丸的病理改变与AZF的缺失部位有显著相关性。 AZFa：Sy84,Sy86 AZFb：Sy124，Sy127，Sy132,Sy134 AZFc：Sy152，Sy157，Sy239，Sy242，Sy254，Sy255 第40页，共52页，编辑于2022年，星期五 AZF检测： SRY存在于基因组中，Yq上的AZFa,b,c 区域的位