临床检验基础 红细胞检验技术 07 RET计数.pptVIP

感谢观看！ Thank！ 网织红细胞计数 （reticulocyte , Ret） CONTENTS 01 目录 02 03 网织红细胞计数原理、参考值 RET计数临床意义 质量控制 教学目标 1 RET计数临床意义 3 掌握网织红细胞计数参考值、临床意义 教学重点与难点 难点： 1、显微镜下特点 2、临床意义 重点： 网织红细胞计数概念、临床意义 网织红细胞计数原理、参考值 01 网织红细胞（reticulocyte）计数 界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核酸经黄焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后，呈现点状或线网状结构，故名网织红细胞。 网织红细胞（reticulocyte）计数 ICSH分型：四型 网织红细胞的形态特点和分型 特点： Ret通常较成熟 红细胞稍大，直径8.0～9.5微米。 网织红细胞（reticulocyte）计数 外周血哪型多？ 分型 形态特征 正常存在部位 I型(丝球型) RBC几乎被网织物充满 仅在正常骨髓 Ⅱ型(网型) 位于RBC中央线团样结构松散 大量存在于骨髓 Ⅲ型(破网性) 网状结构稀少,呈不规则枝点状排列 少量存在于外周血中 Ⅳ型(点粒型) 嗜碱性物质少,呈分散的细颗粒、短丝状 主要存在于外周血中 表1-4网织红细胞分型及特征 网织红细胞（reticulocyte）计数 HeiLmyer分型 花冠型 丝球型 网型 网织红细胞（reticulocyte）计数 破网型 点粒型 HeiLmyer分型 网织红细胞（reticulocyte）计数 1、显微镜计数法 （1）特殊染色法：染色原理 网织红细胞内RNA的磷酸基（带负电荷）能与灿烂甲酚蓝、新亚甲蓝等碱性染料的有色反应基团（带正电荷）结合，形成核酸与碱性染料复合物的多聚体，凝成颗粒，其颗粒又联缀成线，而构成浅蓝或深蓝的网织状结构。 网织红细胞（reticulocyte）计数 1、显微镜计数法 （1）特殊染色法：染料 煌焦油蓝：溶解度低、易形成染料沉渣，变性珠蛋白小体、血红蛋白包涵体等也被染色，不易辨认。 新亚甲蓝：WHO推荐，对RNA着色强而稳定，Hb几乎不着色。 网织红细胞（reticulocyte）计数 1、显微镜计数法 （1）特殊染色法：方法 试管法：为推荐方法 玻片法：水分容易蒸发、涂片困难，染色时间短及染料沉渣的干扰，使计数结果不准确。 网织红细胞（reticulocyte）计数 1、显微镜计数法 （2）米勒（Miller）窥盘法 将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和网织RBC。该方法可明显提高计数的准确性和准确性。 B 3 1 A 网织红细胞（reticulocyte）计数 1、显微镜计数法 （2）米勒（Miller）窥盘法：计算 网织红细胞%= ×100 绝对值计算：最后单位表示成（ × 109/L） 大格网织红细胞总数 小格红细胞总数×9 网织红细胞（reticulocyte）计数 Reti/(%) 计数Milier窥盘小方格RBC 相当于视野法计数RBC数目 1~2 1000 9000 3~5 500 4500 6~10 200 1800 11~25 100 900 表1-5 ICSH控制Reti计数需镜检的RBC数目(CV=10%) 网织红细胞（reticulocyte）计数 Ret/(%) 计数Miller窥盘小方格RBC 相当于缩视野法计数RBC数量 1~2 444 4000 3~5 222 2000 6 111 1000 表1-4-5 卫生部临床检验中心 控制ret计数CV≤15%需镜检的RBC数量 网织红细胞（reticulocyte）计数 方法 优点 缺点 显微镜计数法 为参考方法,操作简便、成本低 影响因素多、重复性差,难以批量检测 流式细胞仪法 灵敏度、精密度高,适合批量检测 仪器贵,成本高,成熟红细胞易被污染而影响准确性,目前科研应用较多 全自动血细胞分析仪法 测量细胞多,灵敏度、密度高,易于标准化,适合批量检测 影响因素多,HJ小体、有核红细胞、巨大血小板可致假性增高 表1-4-6 网织红细胞计数的方法学评价 网织红细胞（reticulocyte）计数 ２、流式细胞仪法 抗凝全血噻唑橙（荧光染料）