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职业教育医学检验技术专业教学资源库 临床输血检验技术 输血相容性检测技术 信阳市中心医院 郑萍 输血相容性检测 ABO血型和RhD血型鉴定 交叉配血试验 不规则抗体筛查 ABO血型和RhD血型鉴定 在各类血型中，由于A、B抗原性最强，D抗原性次之，当受血者接受了所缺少的A、B抗原后，几乎每个人都发生特异性同种免疫反应，大约50%-70%的D抗原阴性者，接受了D抗原阳性血液后产生抗D抗体，因此受血者和供血者血型必须在输血前给予确认。 《临床输血技术规范》第十五条 输血科（血库）要逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样，复查受血者和供血者ABO血型（正、反定型），并常规检查患者Rh（D）血型（急诊抢救患者紧急输血时Rh(D)检查可除外），正确无误时可进行交叉配血。 交叉配血试验示意图 供血者 受血者 红细胞 红细胞 血清 血清 (主侧) (次侧) 交叉配血试验 供血者的红细胞（DC）与受血者的血清（PS）进行配合实验(主侧) 受血者的红细胞（PC）与供血者的血清（DS）进行配合实验(次侧) 交叉配血试验-------微柱凝胶介质抗人球蛋白法 1滴0.8%供血者红细胞 1滴受血者血清（浆） 1滴0.8%受血者红细胞 1滴供血者血清（浆） 置37℃孵育器15分钟后按要求离心 主侧 次侧 交叉配血试验-------低离子凝聚胺介质法 凝聚胺分子是带高价阳离子多聚季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的Zeta电位，可进一步增加抗原抗体间的吸引力。 当血清中存在IgM或IgG类血型抗体时，与红细胞发生紧密结合，此时加入枸橼酸盐解聚液以消除凝聚胺的正电荷，使IgM或IgG类血型抗体与红细胞产生的凝集不散开；如果血清中不存在IgM或IgG类血型抗体，加入解聚液可使非特异性凝集消失 2滴受血者血清（浆） 1滴供血者红细胞悬液 2滴供血者血浆 1滴受血者红细胞悬液 交叉配血试验-------低离子凝聚胺介质法 主侧 次侧 加入一定量低离子介质溶液（LIM），混匀 加2滴凝聚胺溶液，混匀，1000g离心15秒，弃上清，轻摇试管，观察结果 加入2滴重悬液 有凝集 无凝集 重做试验 轻轻混匀，1分钟内观察凝集是否消失，有无溶血 弱凝集时，涂片镜检，记录结果 交叉配血试验-------低离子凝聚胺介质法质量控制 可用EDTA抗凝标本代替血清，不能使用含柠檬酸钠和肝素抗凝标本 血清（浆）中存在冷凝集素时，可影响配血结果的判断。此时可在最后加重悬液时，将试管立即放入37℃水浴中，轻轻转动试管，并在1分钟内观察结果 聚凝胺只能使正常红细胞发生凝集，对缺乏唾液酸（如T及Tn细胞）无作用 凝聚胺是一种抗肝素试剂，若受血者血液标本中含有肝素，可使红细胞之间的非特异性凝集反应减弱。因此，血液透析患者血样常常会导致主侧不出现凝聚胺引起的非特异性凝集反应。在临床工作中需多加几滴凝聚胺试剂以中和肝素。最好改用抗人球蛋白交叉配血试验，确保试验的准确、可靠，避免输血反应的发生。 交叉配血试验——低离子凝聚胺介质法质量控制 操作过程中加样量不准、反应时间不够、离心力不足及看结果时候振摇过重都会造成阳性结果减弱。要严格按照操作说明操作。 至少在每天试验开始前、试验中途更换试剂批号后应做质控试验，受检标本与质控品应采用完全相同试验操作步骤。每次质控试验应至少选择两组质控品。一组为一个包含IgM抗体受血者质控品，一个阳性供者质控品和一个阴性供者质控品。另一组为一个包含IgG抗体受血者质控品，一个阳性供者质控品和一个阴性供者质控品。 按要求参加室间质评。出现成绩不合格时，实验室应停止该检测项目，认真分析、查找原因，制订并实施整改、预防措施，在得出满意评估结果后，方可重新开展本检测项目。 抗A、抗B以外的血型抗体 检测受检者血清（或血浆）中是否存在不规则抗体，通常选择2个或3个，具有能覆盖常见的、有临床意义的血型抗原的O型红细胞，检测患者血清中37℃有反应活性的抗体 《临床输血技术规范》第十七条 凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作抗体筛选试验： 交叉配血不合时； 对有输血史、妊娠史或短期内需要接收多次输血者。 抗体筛查——抗人球蛋白试验 抗人球蛋白试验是鉴定不规则抗体最可靠的方法。该方法通过抗人球蛋白的桥联作用，能够使抗体致敏的红细胞发生凝集反应。 抗人球蛋白试验操作（以3系抗体筛查红细胞试剂为例） 阴性 红细胞凝集或溶血，提示可能有自身抗体存在 离心后应立即判读结果 红细胞应充分洗涤 抗体筛查———微柱凝胶介质抗人球蛋白法 将不规则抗体筛查红细胞和被检血清分别加入微柱凝胶卡中，放37℃孵育器中孵育后，如果血清（浆）中存在针对红细胞抗原的血型抗体（无论是IgM或IgG