食品中致病与病毒.pptVIP

5=2 SOSo 3 第八章食品中致病菌和病毒  8.1肠杆菌科 肠杆菌科是存在于人和动物肠道或自然界中的 群生物学性状很相似的革兰氏阴性短小杆菌。 无芽孢,多数有周身鞭毛,能运动 在普通培养基上能生长。 培养温度为35°。 需氧或兼性厌氧。 能还原硝酸盐为亚硝酸盐,氧化酶试验阴性, 触酶试验阳性。  8.1.1大肠杆菌 大肠杆菌E.cOli是肠道正常菌群。一般情况下 多不致病,是人和动物肠道中的常居菌。 在一定条件下,可引起肠道道外感染 致病性大肠杆菌:肠产毒性大肠杆菌 ( Enterotoxigenic E.col);肠致病性大肠杆菌 ( Enteropathogenic E.col);肠侵袭性大肠杆菌 ( Enteroinvasive e.col);肠出血性大肠杆菌 ( Enterohemorrhagic E coli)。引起腹泻、出血 性肠炎。  肠产毒性大肠杆菌( Enterotoxigenic E coli, ETEc ☆引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水 泻,也可呈严重霍乱样症状。腹泻常为 自限性,一般2-3d即愈。 ◆鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素, 血清型有一定的参考意义。  肠致病性大肠杆菌 令肠致病性大肠杆菌( Enteropathogenic E. cOli,EPEC)是婴儿腹泻的主要病原菌, 具有高度传染性,严重者可致死,成人 少见。EPEC产生VT毒素。VT毒素具有 神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。 今鉴定EPEC根据临床表现和血清型。  肠侵袭性大肠杆菌( Enteroinvasive e.coli, EIEC) EIEC的多数菌株无动力,生化反应和抗 原结构均类似痢疾杆菌。 EIEC可引起豚鼠角结合膜炎,临床上可 借此协助鉴定EIEC。  肠出血性大肠杆菌 肠出血性大肠杆菌( Enterohemorrhagic e.col, EHEC)可引起散发性或爆发性出血性结肠炎。主 要菌型是O157:H,还可有O26、O1、O103 145 等。 2019年O157:H在日本引起万人的食物中毒,此 外,美国、加拿大、瑞典、澳大利亚、英国等国 家和地区相继报道了 EHEC O157:H的散发性感 染和爆发流行。 我国于2019年在苏、皖、鲁、豫发生爆发流行。  肠出血性大肠杆菌O157H的检验方法 培养基制备 改良EC新生霉素增菌肉汤(mEC):EC肉汤灭菌后添 加20mgmL过滤除菌的新生霉素,使终浓度为20pg/mL。 ·改良山梨醇麦康凯琼脂( TC-SMAO):山梨醇麦康凯琼 脂加入过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,使终浓度2.5mg/L, 头孢克污,使终浓度为0.05mg/L。 MUG-LST肉汤:LST肉汤中添加4-甲基伞形酮βD-葡萄 糖醛酸苷(MUG),使终浓度为0.1g①。 增菌培养 称取25克样品放入225 mL mEC中,均质。于41±1℃培养 18-24小时。  3、分离 将mEC肉汤培养物10倍递增稀释。从10,105,10稀释度,各取 01m涂布于 TC-SMAC平板。于36±1℃培养18-24小时。 ·可疑 EHEC O53:H菌落扁平,透明或半透明,边缘光滑,呈淡褐色中 心,直径约2 鉴定 挑取TC-SMAC上的可疑菌落,接种 MUG-LST,于36±1℃培养18-24小 时,出现产气,且无荧光者,分离到普通营养琼脂。 对纯菌落用 EHEC O1s:H标准血清或胶乳凝集试剂作凝集试验,必要时 进行生化试验 在检测过程中,也可以在选择性增菌后,取出5mL增菌液,经100℃水 浴15分钟灭活后,供自动酶联荧光免疫测试( VIDAS),迅速获得初步 结果,阳性反应者需作进一步证实  EHEG0157:H检验程序图解 检样25g mC225mL→酶联荧光免疫测试 VIDAS快速筛选 ↓41±1℃,18-24h 10-,105,10-6稀释度涂布 TC-SMAO ↓36±1℃,18-24h 挑取5-10个可疑菌落接种 MUG-LST MUG阴性培养物转种普通营养琼脂 生化反应鉴定血清凝集鉴定或胶乳凝集试验