食品中沙门氏菌检验汇编.pptVIP

食品中沙门氏菌检验  实验目的 掌握食品中沙门氏菌的检验原理 2、掌握食品中沙门氏菌的检验方法。  实验原理 ()沙门氏菌属简介 1880年E. Berth首先发现伤寒沙门氏菌,1885年 Salmon与 Smith又分离出猪霍乱沙门氏菌,以后取Sa1mon氏之名为 本菌属之名。 沙门氏菌属是一群符合肠杆菌科定义并与其血清学相关的 革兰氏阴性、需氧性、无芽孢杆菌。本菌属种类繁多,抗 原结构复杂,现已发现2000多个血清型,我国已发现血清 型近200个  沙门氏菌属—一生物学特性 革兰氏阴性,大小为 13×0.40.9μm的两 端钝圆的短杆菌,无芽 孢,一般无英膜,除鸡 沙门氏菌和雏沙门氏菌 以外,都有周身鞭毛 运动力强。  沙门菌属—生物学特性 培养特性 少门氏菌需氧或兼性厌氧,10~42℃都可生长,最 适生长温度为37℃,最适pH为6.8~7 营养琼脂平板上:35~37℃培养1824h,其菌落大 小一般为2~3m,光滑、湿润、无色、半透明、边 缘整齐 血平板上:中等大小的灰白色菌落 生化特性 绝大多数沙门氏菌有规律的发酵葡萄糖产酸产气,但也有不产气 者,不发酵蔗糖和侧金盏花醇、不产生吲哚、不分解尿素  沙门氏菌属的抗原 菌体抗原(0抗原) ↓表面抗原(K抗原):ⅵi抗原和M抗原 鞭毛抗原(H抗原) 纤毛抗原  沙门兵菌属致病性 沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致,潜伏 期一般6-2小时,主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头 痛。病程一般1~2天或更长。感染剂量为15~20个菌,死亡率达1~4% 最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。 染源主要是人和家畜的粪便,沙门氏菌常存在于动物中,特别是禽类 和猪。在许多环境中也有存在。从水,土壤,昆虫中,从工厂和厨房设 施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。它们可以存在于多类食品中 包括生肉,禽,奶制品和蛋,鱼,虾和田鸡腿,酵母,椰子,酱油和沙 拉调料,蛋糕粉,奶油夹心甜点,顶端配料,干明胶,花生露,橙汁, 可可和巧克力  二)检验 前増菌一第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌,使 受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态 2选择性增菌一在含选择性抑制剂的促生长培养基中间,样品进一步增 茵的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖,同时阻止大多数 其他细菌的增殖 选择性平板分离一这一步采用固体选择性培养基,抑制非沙门氏菌的 生长,提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。 4.生物化学筛选排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门氏菌培养物菌 属的初步鉴定 血清学技术提供了培养物菌种的鉴定  三,实验仪器和材料 1冰箱:0℃-4℃ 2恒温培养箱:36℃±1℃,42℃ 3显微镜:10×-100× 高压灭菌器 超净工作台 均质器或灭菌乳钵 7架盘药物天平:0g-500g,精确度0.5g 8灭菌广口瓶:500mL 9灭菌锥形瓶:500mL、250mL 10灭菌吸管:10m(具0.1mL刻度) 11天菌培养m:90mm 12灭菌小试管:内径3mm×50mm 13灭菌毛细管  四。培养基和试剂 1一缓冲蛋白陈水(BP 2氯化镁孔雀绿M增菌液 3四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液 4亚硒酸盐胱氨酸(C增菌液 5亚硫酸铋琼脂(BS) 6DHL琼脂 7琼脂:按GB/T4789.28—2003中4.21规定。 8TSI琼脂 蛋白胨水、靛基质试剂 10尿素琼脂(pH7.2) 11氨基酸脱羧酶试验培养基 12沙门氏菌因子血清:按26种用于初步分型;57种用于进 步分型;163种用于详细分型