【临床微生物实验】_白喉棒状杆菌和炭疽芽孢杆菌.pptVIP

皮肤炭疽（特征性黑炭样坏死） 炭疽相关性安全防护 特点： 生物战武器库中主要生物武器之一 皮肤炭疽容易治愈 肺炭疽最危险，按甲类传染病管理 防护： 专用实验室或指定区域；穿戴可处理的手套、工作服及防菌靴，可考虑使用头部装备和防尘面罩；操作台铺含消毒剂湿巾，用后浸泡消毒。 污染物焚烧、高压灭菌，不能高压灭菌的应浸入0.5%过氧乙酸10mins以上，也可用4%的高锰酸钾溶液浸泡15mins以上。 细菌特性——形态染色 革兰阳性大杆菌，两端截平或稍凹陷 有氧条件下形成芽胞、无鞭毛、可有荚膜 竹节样链状排列 患儿咽部白膜延伸到悬雍垂 白喉在咽部形成的白膜延伸至喉内导致呼吸道阻塞（患儿表现为呼吸困难） 抗毒素免疫 感染后机体可获得牢固的免疫力 机体还可通过其它方式获得免疫力： 六月以下婴儿---------母亲 成人--------------隐性感染、人工主动免疫 易感者： 1~5岁儿童 成人---也有可能 免疫性： 防治原则： --人工主动免疫——白喉类毒素 DPT混合疫苗：白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素（白百破混合疫苗） --人工被动免疫——白喉抗毒素+白喉类毒素 --治疗：抗毒素+抗生素 早期足量注射白喉抗毒素，使毒素在与细胞结合以前被抗毒素中和 二、生物学特性 白喉棒状杆菌的形态学特征 细长杆菌，粗细不一，一端或两端膨大呈棒状，排列不规则，呈栅栏状、V字形或L形。 奈瑟染色 革兰染色 革兰染色 白喉棒状杆菌的形态学特征 异染颗粒 成分： 核糖核酸 + 多偏磷酸盐 作用： 储存养料，有鉴定价值 Albert染色 奈瑟法 培养特性 *吕氏血清斜面培养物 含凝固的血清，生长迅速，异染颗粒明显。 *亚碲酸钾血平板 黑色菌落。 还原 在亚碲酸钾血琼脂平板上的白喉棒状杆菌菌落（18～24 h） 亚碲酸盐 碲（黑色） 根据对亚碲酸钾的还原能力、菌落形态及生化反应可将白喉棒状杆菌分为3种类型：重型（gravis）、轻型（mitis）和中间型（intermedius）。 重型 轻型 菌落不溶血、不规则、有条纹 菌落β溶血、光泽、凸起 轻型菌落 液体培养基： 生长较好，但菌型不同其生长特点也不相同 重型：表面有菌膜，液体澄清，粗大颗粒沉淀 中间型：微细颗粒状，混浊，沉淀少或无 轻型:均匀混浊，有沉淀 生化反应： 分解葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、甘露糖产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖，硝酸盐还原（+）、触酶（+）、吲哚 （-）、氧化酶（-）、明胶液化（-）尿素（-） 重型能分解淀粉、糖原、糊精，迟缓分解蔗糖 变异 * 白喉棒状杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异。 *无毒株 溶原性细菌（产生外毒素） β-棒状杆菌噬菌体 编码外毒素的tox基因 抵抗力 * 抗寒冷和干燥 * 对湿热抵抗力弱 * 对青霉素、氯霉素、红霉素敏感 对磺胺不敏感 微生物检验 毒力试验 患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等 直接涂片染色镜检（G 染色+异染颗粒染色） 吕氏血清斜面35℃8～12h 亚碲酸钾BAP、35℃24～48h BAP35℃16-18h 涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色） 观察菌落特点 吕氏血清斜面 生化反应 涂片染色镜检 微生物检验 2 标本采集 3 检验方法 （1）显微镜检查 直接涂二张片，分别作革兰和异染颗粒染色。 如发现革兰阳性棒状杆菌，形态典型，且有明显异染颗粒，可作“直接涂片检出形似白喉棒状杆菌”的初步报告。 分离培养： 吕氏血清斜面 37℃、8～12h →→涂片染色镜检 --检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP 37℃、24～48h，黑色菌落 BAP 轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别 鉴定 形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 —鉴别棒状杆菌属不同的种 白喉：葡萄糖 （+）、麦芽糖 （+） 蔗糖 （-） API棒状杆菌鉴定试剂盒 毒力鉴定：动物试验，Elek平板毒力实验 白喉杆菌菌苔 沉淀线(阳性) 含白喉抗毒素滤纸片 Elek毒力实验结果 动物试验 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验 小 结 白喉棒状杆菌为急性呼吸道传染病白喉的病原菌；白喉毒素为其致病物质，所形成的假膜可致患者窒息。 形态学检查有诊断价值，常用异染颗粒染色法；在亚碲酸钾血平板菌落呈黑色。分离到本菌后应作毒力试验，确定是否为能产毒素的有毒株。 广州医科大学 临床微生物检验 炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis) 发现炭疽芽孢杆