ERCC1、survivin表达与含顺铂方案一线化疗治疗晚期肺腺癌患者疗效和预后关系.docVIP

ERCC1、survivin表达与含顺铂方案一线化疗治疗晚期肺腺癌患者疗效和预后关系 　　 【关键词】 肺腺癌 er survivin 顺铂 　　 　　 非小细胞肺癌是引起肿瘤相关死亡的主要原因之一，晚期患者如不治疗，中位生存时间仅约4～6个月[1]。肺腺癌是我国常见的一类非小细胞肺癌，因早期诊断困难，多数患者确诊时已到晚期，失去手术根治机会，使化疗成为其主要治疗手段，但化疗耐药的存在使其总治愈率仍低于15％[2]。因此，寻找化疗耐药的分子指标，实现晚期患者的个体化化疗成为研究热点。以顺铂为基础的联合化疗是晚期肺腺癌的一线化疗方案，顺铂主要是与肿瘤细胞的dna结合，形成顺铂dna加合产物，导致dna链间交联或者链内交联，引起dna损伤[3]。顺铂耐药有多种机制，其中dna损伤修复能力增强是重要分子基础[4]。核酸切除修复（nucleotide excision repair，ner）基因是最常见的修复基因。而在ner家族中，er1(excision repair cross plement1)又是非常重要的一员，有研究认为er1可能是切除修复的关键酶[5]。survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis,iap）家族的新成员，可参与细胞凋亡和细胞分裂双相调控，在已检测的多种人类肿瘤中均高表达[6],但在肺腺癌中的表达目前报道甚少。本研究利用免疫组化方法研究晚期肺腺癌er1、survivin蛋白表达与含顺铂一线化疗方案疗效及预后的关系，以进一步指导临床工作。 　　 　　 1 资料和方法 　　 　　 1.1 临床资料 　　 　　 收集1999年1月～xx年12月在本院使用含顺铂一线化疗方案治疗的、病理确诊为晚期肺腺癌患者的蜡块共80例。其中男性患者58名，女性患者22名。年龄范围为22～81岁，中位年龄为55岁。45名患者确诊为ⅳ期患者，35例为ⅲ期患者（其中ⅲa期11例，ⅲb期24例）。所有患者均接受至少两个周期的含顺铂方案一线化疗（37例采用tp方案：taxol 175mg/m2+ddp 80mg/m2；27例采用np方案：nvb 25mg/m2，d1,8, +ddp 80mg/m2；16例采用gp方案：gemcitabine 1.0 g/m2，d1、8, +ddp 80mg/m2），疗效根据who标准确定。每两个疗程复查ct评价疗效，达到完全缓解（cr）或部分缓解（pr）为化疗有效，稳定（sd）或进展（pd）为化疗无效。有效患者完成至少4个疗程化疗，无效患者换用其他方案或者采用其他治疗方式。从停止治疗后2个月开始随访，每隔2个月重复一次，直到患者死亡。随访1～33个月，中位随访18个月。 　　 　　 1.2 免疫组化试验方法 　　 　　 采用免疫组化方法检测er1、survivin蛋白在肺腺癌患者蜡块中的表达。er1单抗购自neomarker公司；survivin单抗和二抗试剂均购自dako公司。具体操作如下：石蜡切片脱蜡，3％h2o2室温下孵育10min，以消除内源性过氧化物酶活性。蒸馏水冲洗，pbs浸泡5min，正常血清工作液封闭，室温孵育10min，倾去血清，加稀释后er1一抗（1∶100）和survivin一抗（1∶100），4℃过夜，pbs冲洗，滴加二抗，室温下孵育1h，pbs冲洗，滴加辣根酶标记的工作液，室温下孵育30min。pbs冲洗三次，使用dab染色，封片。 　　 　　 1.3 免疫组化结果判断 　　 　　 由资深病理科医生在不明临床资料的情况下进行标本的染色程度判断。er1在细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性染色，survivin在细胞浆内出现棕黄色颗粒为阳性。随机选取10个视野从染色强度和染色百分比进行评估：胞核染色阳性细胞比例10%为阴性，10％～50%为阳性,50％为强阳性。 　　 　　 1.4 统计学方法 　　 　　 使用统计学软件spss10.0进行统计分析，生存资料和时间的比较采用kaplanmeier方法分析。两组间比较采用卡方检验。1年生存率的计算采用life table方法。 　　 　　 2 结果 　　 　　 2.1 er1和survivin表达同临床特征之间的关系 　　 　　 80例晚期肺腺癌患者中共有77例可进行免疫组化染色分析，其余3例因组织过少，不能判读结果，77例患者中有26例（33.77％）患者er1染色阳性，41例（53.25％）患者survivin染色阳性, 见图1。不同临床分期，不同性别的er1和survivin的表达没有差异, 见表1。表1 晚期肺腺癌患者组织中er1、 survivin表达同临床特征间关系 　　 　　 2.2 er1和survivin表达同