演示文稿-细菌的形态观察.pptVIP

细菌的形态观察 学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。 初步认识细菌的形态特征。 学习训练无菌操作技术。 学习并掌握普通光学显微镜的构造和油镜的使用技术及维护的基本知识。 实验目的 实验原理 简单染色是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法，适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。 常用碱性染料进行简单染色，因为在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。 实验原理 显微镜的放大倍数和分辨率 1.放大倍数：物镜放大倍数×目镜放大倍数 2. 显微镜的分辨率:是表示显微镜辨析两点之间距离的能力。可用公式表示为： D=λ/2n· sin(α/2 ) 式中D：物镜分辨出物体两点间的最短距离。 ?：可见光的波长（平均0.55?m) n: 物镜和被检标本间介质的折射率 ?：镜口角（即入射角）。 实验步骤 涂片 干燥 固定 染色 水洗 干燥 镜检 无菌操作 制片过程： 革兰氏染色成败的关键是酒精脱色。如脱色过度，革兰氏阳性菌也可被脱色而染成阴性菌；如脱色时间过短，革兰氏阴性菌也会被染成革兰氏阳性菌。 染色过程中勿使染色液干涸。用水冲洗后，应吸去玻片上的残水，以免染色液被稀释影响染色效果。 选用幼龄的细菌。G+菌培养12h-16h，E.coli培养24h。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应。 注意事项 1、使用显微镜时加香柏油的目的是什么？ 2、在制片的过程中染色剂干涸怎样处理？若干涸会有怎样的影响？ 请阅读引导文，并回答以下问题： End Thanks!