CKMB大于CK现象分析——检验科日常培训.docVIP

CKMB大于CK现象分析——检验科日常培训.doc

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CKMB大于CK现象分析 目前常用的检测CKMB的方法是免疫抑制法,出现CKMB>CK的情况就是由这种方法的检测原理造成的。 在人体中正常情况下CKBB很少,可忽略,而免疫抑制法就是建立在忽略CKBB的基础上的。即是用抗体抑制M亚基,所以CKMM会失去活性,而CKMB活性失去一半。这样测出的CK活性实际就是CKMB的一半,所以CKMB活性应该为测定的2倍。但如果CKBB存在就会使结果偏高,即测定的CKMB活性=CKMB+2CKBB。如果CKBB>CKMM,由于结果要乘2,也就是说2CKBB+CKMB>CKBB+CKMB+CKMM,即测定得的CKMB活性>CK活性。 所以CKMB>CK是可能的的,但CKMB>2CK是不可能的 目前已经有检测CK-MBmass的质量法,其原理是利用单克隆抗体技术和全自动ELISA的方法直接检测CK-MB的浓度,所以可以从根本上解决酶法的不足。 有临床反映在XX全自动生化分析仪个别临床标本其CK-MB检测结果与CK结果不相符,CK结果在正常范围内,而CK-MB结果却明显偏高,甚至出现CK-MB结果高于CK。 本科室CK-MB检测试剂盒为选择抑制动力学法,检测的是CK-MB活性(CK-MB Activity)。该法检测原理为:利用人血清中几乎不含CK-BB的特点,采用抗CK-M单体的抗体将M亚基完全抑制,然后通过一系列反应来检测CK-B的活性,再将CK-B的活性结果乘2即得CK-MB的活性。 分析该法检测CK-MB结果与CK不符的原因可能有: 1、试剂因素 主要表现为试剂污染或使用已过有效期的试剂。 2、仪器因素 市面上CK-MB的校准品或质控品较少见,而且其价格也较其他酶类校准品高得多。因此,一般医院都未使用CK-MB校准品和质控品,而是采用厂家试剂盒使用说明书提供的理论因素,在理论因素设置时,不同仪器略有差异。 3、方法学因素 从抑制法检测CK-MB活性原理中不难分析出当血清中存在多量可检测CK-BB(如颅脑损伤,脑组织几乎都为CKBB),其CK-BB中B亚基活性同CK-MB中B亚基一起被检测后乘2,检测活性结果自然明显高于真实值,甚至出现CK-MB活性大于CK总活性的可能。或如恶性肿瘤,肝硬化等可能存在巨CK,巨CK中的M活性不受抗CK-M单体的抗体抑制,其巨CK-MB中M亚基和B亚基一起被检测后乘2,检测活性结果自然明显高于真实值。 4、溶血因素 因红细胞内含有大量的腺苷酸激酶(AK)从而催化ADP反应生成ATP而引起NADPH的吸光度的改变,使CK和CK-MB测定结果假性偏高。CK-MB是CM-B×2,假性偏高较CM更明显,同时CKMB参考范围较小,可能出现CKMB大于CK,CK结果在正常范围内,而CK-MB结果却明显偏高。5、随机误差,如吸到小气泡等 本科室CK-MB日标本检测量较大,绝大多数临床标本检测结果较好,极个别标本出现CK-MB占CK总活性偏高。其参数设置和试剂空白校准均无问题,因此可排除仪器试剂因素。对异常结果一般重复检测,以排除随机误差,注意结合临床。对溶血标本,联系临床有无需要重抽复查,及做好溶血会对生化有关项目测定影响的解释工作,并备注标本溶血。 附有关资料: 肌酸激酶检测原理: 肌酸激酶催化磷酸肌酸与ADP作用生成肌酸和ATP。ATP在己糖激酶(HK)的作用下与葡萄糖反应生成ADP和葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)。葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)作用下与NADP+反应生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH。通过测定NADPH在340nm处吸光度增加的速度可求得肌酸激酶的活力。 CK(HK) 磷酸肌酸 + ADP ────→ 肌酸 + ATP HK ATP + 葡萄糖 ─────→ 葡萄糖-6-磷酸 + ADP G-6-PDH 葡萄糖-6-磷酸 + NADP+ ──────→ 6-磷酸葡萄糖酸 + NADPH + H+ 正常人组织中通常含有CK-BB(CK1)、CK-MB(CK2)、CK-MM(CK3)三种同功酶。CK-BB主要存在于脑组织、胃肠道及子宫平滑肌中,脑组织中几乎全为CK-BB,CK-MB主要存在于心肌组织中,CK-MM主要存在于骨骼肌组织中。在正常人血清中几乎无CK-BB或非常痕量

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