HIV抗体检测标准操作程序（SOP）.doc

HIV抗体检测标准操作程序（SOP） ——微生物科 样本的采集和处理 二、检测方法和步骤 三、质控品的应用方法 四、仪器的使用和维护 五、结果的记录、解释与报告 六、必威体育官网网址程序 七、实验室的清理、消毒 八、艾滋病检测实验室安全防护 九、附表 样品的采集和处理 1.样品的采集： 1.1血清样品采集：用注射器抽出一定量静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用3000rmp离心15min，吸出血清备用。 1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 1.3采样注意事项： 1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。 1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。 2、样品的保存： 2.1用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20摄食度以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8摄食度。 3.样品的运送： 3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、、采样时间。 3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 3.3特殊情况下如需对个别样品进行复测，可以用特快专递形式投寄，但必须将盛有样品的试管包扎好，保证不会破碎和遗漏。 4.样品的接收： 4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。 检验方法和步骤 1.检验方法：酶联免疫吸附试验（ELISA） 2.检验步骤：严格按照试剂说明书操作。 3.注意事项： 3.1禁止肉眼判读！ 3.2保证酶标仪，洗板机正常运转，保证加样器准确，选择高质量的与加样器配套的TIP头 3.3使用有效期内的试剂 3.4保证样品质量 质控品的应用方法 1.质控品按临床样本对待，操作应依照实验室安全管理条例执行。 2.质控品使用前应在室温（18－25℃ 3.外部对照的设立：日常检测中，每次试验均应设立一孔外部对照（一次试验中使用多块酶标板时，每块酶标板均应单独设立一孔外部对照）。 4.质控品开盖使用后，可保存于2－8℃ 5.质控品应避免反复冻融。 仪器的使用和维护 1.设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转；根据使用情况更换必要的部件：　　1.1酶标读数仪、洗板机　　每天：核对滤光片波长，检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。　　每周：清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰尘。 　　每月：检查洗涤时各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。　　每年：检查、清洗滤光片，如果出现破裂或霉点则要更换。根据仪器内具有的校准程序或使用校准板，对滤光片的精密度进行校验并保留记录。　　　　1.2移液器 ：　 一年至少应该标定一次，发现异常情况应随时进行标定。　　标定方法包括有色溶液光谱分析法、称量校准法、同位素计数法以及使用配套校准盒等。标定多道移液器时，必须保证每一个加样头都能够连续、准确地加样。移液器的精密度应在厂家说明书规定的范围内。 　　范例 用蒸馏水称量法标定移液器：　　在室温为22 ℃的无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待标定的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入烧瓶底部，称重并计算蒸馏水重量，连续称重10次。加蒸馏水的量根据待标定移液器的规格而不同（见下表），10次标定称量均在要求的重量范围内为合格，贴上合格标签，注明标定日期，不合格移液器要请生产厂家进行校准。填写和保存较准记录。 　　 称重法标定移液器方案 移液器规格 蒸馏水量 要求重量范围 0.5 – 10 μl 2 μl 1.75 - 2.25 mg 5 – 40 μl 10 μl 9.8 - 10.2 mg 40 – 200 μl 70 μl 69.4 - 70.6 mg 200 – 1000 μl 300 μl 298.0 - 302.0 mg 1 – 5 ml 2000 μl 1990.0 - 2010.0 mg 2 – 10 ml 3500 μl 3485.0 - 3515.0 mg 3、冰箱和孵育箱：　　定期检查温度并作好记录，必须每天检查和记录低温及超低温冰箱的温度。　　4、定期检查其他仪器设备。 结果的记录、解释与报告 1.HIV抗体筛查　　1.1筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告。　　1.2筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV抗体待复查”报告（附表1），不能出阳性报告