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植物激素检测技术 --科标检测 植物激素是植物体内合成的一系列痕量有机化合物,它在植物的某一部位产生,运输 到另一个或一些部位,在极低的浓度下便可引发生理反应,几乎参与了调控植物从种子休 眠、萌发、营养、生长和分化到生殖、成熟和衰老的每个生命过程,既可调控植物自身的 生长发育,又通过与植物所生存的外部环境互相作用调节其对环境的适应。通过调控如细 胞分裂素、油菜素内酯和生长素等植物激素的代谢可显著地改良作物的株型结构和产量构 成,从而大幅度提高作物产量和品质。 青岛科标检测研究院--生物实验室,拥有先进的仪器设备和丰富检测经验,根据国内 外先进技术,可以根据不同样品不同检测需求,值得最优检测方案为企业和研究机构提供 精确、公正的数据支持。 1 植物激素主要包括生长素(auxin)、赤霉素(gibberellin,GA)、细胞分裂素(cytokinin, CTK)、脱落酸(abscisic?acid,ABA)、油菜素甾醇类(brassinosteroids,BRs)、茉莉酸(jasmonic acid,JA)及其甲酯(MeJA)、水杨酸类(salicylic?acids,SA)、乙烯(ethylene)和多肽激素(peptide hormones)等,它们在植物体内的含量极低(通常在?ng/g,甚至?pg/g?水平上),且周围共存的 基体成分非常复杂,几乎不可能同时分析所有植物激素。此外,多数植物激素的性质不稳 定,对温度等外界条件敏感,在各器官中呈现定的动态分布。因此精确可靠地对超微量的 植物激素进行定性和定量分析尤为重要。 本文仅就近年来国内外在茉莉酸及其甲酯、脱落酸、生长素、赤霉素和多肽激素等植 物激素分析检测技术的必威体育精装版发展及应用情况进行综述。 2 主要分析技术 生物鉴定法是一类经典的植物激素检测方法,它利用激素作用于植物的组织或器官时 产生的特异性反应对植物激素进行测定。1928?年,Went?首先将这种方法运用于生长素的 测定,利用生长素能使燕麦胚芽鞘弯曲的特性来测定生长素浓度。生物鉴定法虽然简便, 但对样品纯度要求较高,需要复杂的样品前处理过程来实现,同时由于其专一性和重复性 较差,因而这种方法的应用逐渐减少。 免疫检测技术是测定植物激素的常用方法。该方法是基于抗原和抗体的特异性结合, 因此有较好的专一性。采用放射性元素标记的方法,即放射免疫分析(radioimmunoassay, RIA),其检测灵敏度高,重复性好,但对实验条件的要求较高。酶联免疫吸附分析(enzyme- 1inked?immunosorbent?assay,ELISA)是一种简单易行并被广泛应用的分析检测技术,其原理 主要是将抗原或抗体固定在载体表面,再与酶标记的抗体或抗原进行结合,洗涤除去未结 合的部分后进行检测。Maldiney?等在?ELISA?中引入抗生物素蛋白-生物素复合物体系,测定 了生长素、脱落酸和玉米素核苷三种激素,检测限能够达到?3~5pg。此外,免疫传感器也 开始用于植物激素的测定,主要利用抗原和抗体间的相互作用进行识别,当被分析物(抗 原)与抗体结合后,检测信号利用转换器转换为电信号,从而进行定量检测。免疫检测的方 法一来容易受到交叉反应的干扰;二来由于抗体的不通用性以及制备时间较长,使得整个 实验周期较长。 近年来,色谱技术的飞速发展使其在植物激素检测中的应用越米越广泛,主要利用各 组分在色谱固定相上保留性质的差异实现分离,并根据色谱图中得出样品含量及纯度信 息。气相色谱火焰离子化检测法(GC-FID)和气相色谱质谱法(GC-MS)能够对所分析样品进行 准确、高灵敏度测量,但由于气相色谱对样品的特殊要求,使得待测组分需具有一定挥发 性,因此在植物激素样品的前处理过程中需对样品进行衍生化。高效液相色谱紫外检测法 (HPLC-UV)、高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FL)和高效液相色谱质谱检测法(HPLC-MS)也大量 用于植物激素的纯化及定量分析,其中?MS?因为具有良好的选择性和灵敏度,并且能够给 出化合物的结构信息,在实际检测中得到了更普遍的运用。以?MS?作检测器时,常采用稳 定同位素标记的化合物作为内标,这样既扣除了萃取步骤中样品损失的影响,同时也能排 除背景基质干扰,因此使得定量分析结果更为准确。此外,毛细管电泳技术(CE)的样品消 耗量少、分离效果好,因而也是分离检测植物激素的有效手段,但由于灵敏度和重现性等 方面的限制阻碍了其进一步的运用。 另外,目前还有一些其他的分析方法也被用于植物激素的检测,如光谱法、电化学法 等。本文主要介绍以色谱法为主的植物激素分析检测技术的研究进展。 3 各类植物激素检测技术现状 3.1?茉莉酸及其甲酯 茉莉酸(JA)是十二碳的环戊烷酮酸,具有多种生物功能,可作为植物在应对
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