Q_HBYH010-2019蛭弧菌企业标准.pdf

Q/HBYH 湖北远昊生物科技有限公司企业标准 Q/HBYH010-2019 蛭弧菌 2019-06-27 发布 2019-07-10 实施 湖 北 远 昊 生 物 科 技 有 限 公 司 发布 Q/HBYH010-2019 前 言 本标准由湖北远昊生物科技有限公司提出。 本标准由湖北远昊生物科技有限公司起草。 本标准起草人为：韩凯。 本标准为首次发布。 Q/HBYH010-2019 蛭弧菌 1 范围 本标准规定了蛭弧菌的要求、试验方法、检验规格、包装、标签、使 用说明、运输和贮存。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包 括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 191 包括储运图示说明书 GB/T 9969.1 工业产品使用说明书 总则 GB/T 13267 水质 物质对淡水鱼（斑马鱼）急性毒性测定方法 JJF 1070 定量包装商品净含量计算检验规则 国家质量监督检验检疫总局令第75 号《定量包装商品计量监督管理办 法》 3 技术要求 3.1 外观 白色浑浊状液体。 3.2 理化指标 8 蛭弧菌活菌数≥10 CFU/ml。 Q/HBYH010-2019 3.3 安全 根据美国环保局（Usefa）毒性分级标准，本品无毒性。半数死浓度LD50 ≤96h。 3.4 净含量允差 应符合 《定量包装商品计量监督管理办法》的规定。 4 试验方法 4.1 外观 凭感觉器官直接进行判定。 4.2 蛭弧菌活菌数 4.2.1 原理 4.2.1.1 定性检测 蛭弧菌是一种依赖其他宿主细菌进行生长繁殖的寄生性细菌,具有噬 菌体的特性,能够在自来水双层琼脂平板上通过裂解宿主菌而产生圆形、透 明、清晰、光滑、边缘整齐的噬菌斑，因此利用蛭弧菌的这种特性，采用 自来水双层琼脂平板法观察双层平板上有无噬菌斑产生，对产品中的蛭弧 菌进行鉴定。 4.2.1.2 定量检测 在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带有负电荷，碱性材料 在电离时，其染色部分带正电荷，因此很容易与细菌结合使细菌着色。经 染色后的细菌细胞与北京开成鲜明的对比，在显微镜下更容易识别。因此， Q/HBYH010-2019 将少量待测产品的悬浮液置于载玻片上，在载玻片上一圆形区域（已知） 内涂片、干燥、固定，然后通过简单染色对蛭弧菌和产品中的其他细菌进 行染色后油镜下观察记录产品中总细菌浓度（A）；由于蛭弧菌在普通营养 琼脂平板不形成菌落，因此，产品中除蛭弧菌之外的其他细菌浓度（B）通 过平板菌落计数法进行测定；因此产品中蛭弧菌的浓度（C）=A -B。 4.2.2 材料 自来水双层平板（底层琼脂浓度为 1.5%，上层琼脂浓度为 0.6%），营 养肉汤（NB），NB/500 营养液，普通营养琼脂平板，盛有9ml 无菌生理盐水 8 的试管，结晶紫染液，增殖宿主菌悬液（＞10 cfu