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第二十二章 感染性疾病与感染免疫检测
第一节 细菌感染性疾病的免疫检测
临床上最为常用的是病原体抗原检测和宿主血清抗体检测。患者样本中若有病原体抗原检出,即可表明有该病原体的存在;病原体感染机体时可诱导产生相应的抗体,特异性抗体的检出是临床诊断的重要依据。 一、链球菌感染 (一)链球菌 链球菌感染最常用的免疫学实验室检查是抗链球菌溶血素“O”(ASO)检测。 临床上常采用胶乳凝集试验、免疫散射比浊法检测ASO。 ASO增高常见于急性咽炎等上呼吸道感染、风湿性心肌炎、心包炎、风湿性关节炎和急性肾小球肾炎。 (二)猪链球菌 猪链球菌的实验室检查有细菌培养、鉴定和免疫学检测等方法。 分子诊断技术是鉴定分型诊断方法,常用于猪链球菌的快速诊断以及流行病学调查。免疫学技术主要应用患者血清学鉴定。 二、伤寒沙门菌感染 沙门菌可致多种感染,轻者为自愈性胃肠炎,重者可引起致死性伤寒。 伤寒沙门菌感染的实验室诊断主要依赖于免疫学检测方法。 1.肥达反应 伤寒沙门菌有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面(Vi)抗原,三者的抗体均非保护性抗体。由于(O)与(H)抗原的抗原性较强,故常用于作血清凝集试验(肥达反应)辅助临床诊断。产生凝集时抗体效价≥1:80为阳性,或双份血清效价呈4倍以上增长,结合流行病学资料可以作出诊断。 2.酶联免疫吸附试验(ELISA) 可用于检测伤寒沙门菌的抗原和抗体。 目前有:①以伤寒沙门菌脂多糖(内毒素的主要成分)为抗原,用间接ELISA法检测伤寒患者血清中特异性IgM抗体,该方法有助于伤寒的早期诊断。②以高纯度的伤寒沙门菌Vi抗原包被反应板,采用ELISA法测定患者血清中的Vi抗体,有助于检出伤寒带菌者及慢性带菌者。 三、结核分枝杆菌感染 结核分枝杆菌感染的免疫学方法有: 1.结核菌素试验(tuberculin test) 包括针对旧结核菌素(old tuberculin,OT)与结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)两种菌体蛋白。 2.分枝杆菌抗体检测 以分枝杆菌外膜抗原为已知抗原,检测待测血清中的分枝杆菌抗体。可采用胶体金方法进行。需注意的是,其他分枝杆菌感染、麻风病也可呈阳性。 3.全血干扰素测定法 当全血与PPD和对照抗原(植物血凝素)共同孵育后,致敏的淋巴细胞可分泌IFN-γ,通过检测IFN-γ的含量来鉴定菌种。本试验所得结果与结核菌素试验相当,且具有受BCU接种史影响小、又能与非结核分枝杆菌进行区分的优点,同时还可避免结核菌素试验在操作上与结果判断上存在的多种主观或人为因素的影响。
第二节 真菌感染性疾病的免疫检测
一、深部真菌感染 (一)念珠菌感染 (二)隐球菌感染 (三)曲霉感染 (四)真菌感染的免疫学检测 二、类真菌感染 卡氏肺孢菌,又称卡氏肺孢子虫,为类真菌。 目前病原诊断主要依靠形态学检查,呼吸道分泌物或肺活检组织切片染色见肺泡内泡沫状嗜伊红物质中富含本病原体。支气管灌洗术和支气管肺活检时本病原体发现率可达90%。近年来,ELISA和胶乳微粒凝集试验被用于检测抗原抗体和相应抗原,同时分子生物学技术(如PCR)也被用于快速早期诊断。
第三节 病毒感染性疾病的免疫检测
一、流感病毒感染 (一)流感病毒免疫学检测主要包括: 1.病毒的抗原检测 常采用免疫荧光或酶标记技术,以标记的特异性抗体检测鼻咽分泌物中的流感病毒抗原。 2.病毒的抗体检测 ①血凝抑制试验或补体结合试验可以检测急性期和恢复期患者血清总抗体效价,效价4倍升高有助于回顾性诊断和流行病学调查,但不能用于早期诊断。 ②时间分辨免疫荧光技术检测流感病毒抗原。 (二)禽流感病毒 AIV感染的免疫学诊断主要包括对 AIV特异性IgM和IgG抗体的检测。检测方法包括:禽流感血凝抑制试验、神经氨酸抑制试验、琼脂免疫扩散试验、ELISA法及抗体斑点。ELISA(Dot-ELISA)法等。 二、轮状病毒感染免疫学诊断包括: 1.RV抗原检测 用 ELISA或者免疫酶斑点试验从粪便标本中检测RV抗原,如果结果阳性则可诊断为RV感染。如用单克隆抗RV抗体检测,灵敏度可大大提高,可用于患者诊断和疫情诊断。 2.抗体检测 可采用ELISA法检测血清中特异性IgM、IgG抗体,通常RV感染5天后患者血清中即可测出IgM抗体水平的升高,因此可用于临床轮状病毒感染的早期诊断。IgG抗体的检测常采用发病早期和恢复期双份
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