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降压物质检查法DEPRESSOR SUBSTANCES 山东省药品检验所 内容提要 基本概念和原理 2010年版增修订内容 检查法 欧洲药典降压物质检查法 组胺类物质检查法 基本概念和原理 ?检验目的 组胺、缓激肽一类的物质具有血管扩张作用，超过一定剂量会使血压快速降低，对人体产生危害。 来自动物或微生物发酵提取物及生产过程中有可能混入此类物质的原料，应建立降压物质检查项，如抗生素、氨基酸、多肽等。 来自动植物、微生物发酵提取物及生产过程中有可能混入组胺类或类组胺类物质的注射剂(静脉），应建立降压物质检查项。如抗生素、中药注射剂、氨基酸、多肽类等。 基本概念和原理 降压物质检查法定义：本法系比较组胺对照品（S）与供试品（T）引起麻醉猫血压下降的程度，以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定 本法原理是利用猫对组胺样物质具有较为敏感的作用，通过静脉给予一定剂量的供试品，观察对麻醉猫血压的影响，以判定供试品中降压物质的限度是否符合要求。 2010年版增修订情况 历史沿革 1985年版药典至现行药典（2005年版）方法基本一致 2005年版动物去掉了狗（5kg以上） 2010年版修订 2010 版与2005版区别 2010 版与2005版区别 修订背景 1、强调对照品的降压活性要符合要求 2、强调猫的正常血压范围为13.3~20.0kPa 3、强调每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行，而不强调要3~5分钟之内。 检查法-材料 1 血压记录装置： 生物机能实验系统（多导生理记录仪），相应的传感器，血压计（定标用） 2 动脉插管（细的硬塑料管）、静脉插管（10号或12号钝针头）、三通等连接装置，可调定量加样器，软管（硅胶管或乳胶管）。 3 1ml 、2ml、 5ml、10ml注射器（4号半针头），玻璃容器 ：吸管、容量瓶等 4 相应精度天平（对照品万分之一）、动物天平（秤） 5 试剂：供试品、组胺对照品、肝素钠（针剂或原料均可）、苯巴比妥钠注射液、戊巴比妥钠等麻醉剂，生理盐水(氯化钠注射液） 6 手术器械、保温手术台、固定猫用的绳具等 检查法-材料 手术器械：剪毛剪、手术剪、眼科剪、止血钳、手术刀、手术镊、眼科镊（直和弯）、气管插管、动脉夹、脱脂棉、纱布 检查法-对照品 对照品溶液的配制 精密称取磷酸组胺对照品适量，按组胺计算，加水溶解使成每1ml中含1.0mg的溶液，分装于适宜的容器内，4～8℃贮存。经验证保持活性符合要求的条件下 ，可在3个月内使用。 对照品稀释液的配制 临用前，精密量取组胺对照品溶液适量，用氯化钠注射液配成每1ml中含组胺0.5ug的溶液。 注：1 对照品割开勿使玻璃屑调入 2 折算 ×0.362，1mg磷酸组胺相当于组胺 3 贮存液用灭菌水配制，保存，使用时取出放置至室温 检查法-供试品溶液 供试品溶液的配制 按品种项下规定的剂量，配成适当浓度的供试品溶液。试验时，一般要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积应相等。 注：供试品溶液与对招品溶液注入体积应相等，一般为0.2ml/kg体重 举例：注射用阿齐霉素，标准规定注射量为2000u/kg，则应配成10000u/ml，按0.2ml/kg注射，给药量为2000u/kg 供试品和对照品如体积相差过大，可通过补充生理盐水量调整。 检查法 取健康合格、体重2kg以上的猫，雌者无孕。用适宜的麻醉剂(如巴比妥类)麻醉后，固定于保温手术台上，分离气管并插入插管以使呼吸畅通，必要时可进行人工呼吸。在一侧颈动脉插入连接测压计的动脉套管，管内充满适宜的抗凝剂溶液，以记录血压。也可用其他适当仪器记录血压。在一侧股静脉内插入静脉插管，供注射药液用。试验中应注意保持动物体温。全部手术完毕后，将测压计调节到与动物血压相当的高度(一般为13.3～16.0kPa)，开启动脉夹，待血压稳定后，方可进行药液注射。各次注射速度应相同。每次注射后立即注入一定量的氯化钠注射液，相邻两次注射的间隔时间应一致(3～5分钟)，每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行。 动物要求 健康合格，体重2kg以上的猫，雌者无孕。 来源：目前可为市售家猫 一般在3kg以上为好，麻醉耐受性，血压稳定 无孕 实验过程中注意保温 检查法-麻醉 常用麻醉剂和剂量 戊巴比妥钠：静脉注射或腹腔注射30～40mg/kg，一般配成30 ～40mg/ml，按每kg体重给药1ml，一次给药可维持麻醉2～4h，优点为起效快，缺点维持时间短 苯巴比妥钠+戊巴比妥钠：（比例不同实验室不同）苯巴比妥钠（1ml：100mg）135mg/kg＋约2mg/kg戊巴比妥钠（可配成10mg/ml） 乌拉坦：静脉注射