GB/T 34800-2017蛋白酶K酶活力及杂质检测方法.pdf

ICS 07.080 中华人民共和国国家标准 GB/T 34800—2017 蛋白酶K酶活力及杂质检测方法 Detection method of activity and impurity of proteinase K 2017-11-01 发布 2018-05-01 实施 发布 GB/T 34800—2017 ■1Z■ —1— 刖 百 本标准按 GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由中国标准化研究院提出并归口。 本标准起草单位:东营瑞达生物科技有限公司、中国标准化研究院、中国生物技术发展中心、河北农 业大学、浙江工商大学、合肥工业大学、河北省出入境检验检疫局 、泉州市标准化研究所、北京市食品科 学研究院、河北食品检验研究院、河南大学。 本标准主要起草人:方存林 、马爱进、苏月、孙纪录、王彦波、郑磊、刘道亮、林清山、孙勇、云振宇、 傅玲琳、赵琳、吴琦、周魏、康文艺、陈新凯。 T GB/T 34800—2017 蛋白酶K酶活力及杂质检测方法 1范围 本标准规定了蛋白酶K检测原理、仪器设备及器具、主要试剂、分析步骤和结果分析。 本标准适用于生化试剂蛋白酶K产品的生产和检测。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件 。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 34222核糖核酸酶活力检测方法 GB/T 34801脱氧核糖核酸酶活力检测方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 蛋白酶 K proteinase K 能水解天然角蛋白(keratin)的一种丝氨酸蛋白酶。 注 ：按产品形态分为固态和液态。 3.2 蛋白酶K酶活力单位 proteinase K activity unit 在57 £和pH 8.0条件下，在1 min内水解牛血红蛋白产生1 ^mol酚基氨基酸的酶量。 注 ：一个酶活力单位以 表示。 4原理 蛋白酶K可催化脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的竣基端肽键断裂 。它在57 °(?和pH 8.0条件下， 水解牛血红蛋白底物产生含有酚基的氨基酸；在碱性条件下，可将福林(Folin)试剂还原，生成钮蓝与鹄 蓝,其颜色的深浅与酚基氨基酸含量成正比 。通过在680 nm测定其吸光度，得到水解产生的酚基氨基 酸的量，进而计算蛋白酶K酶活力。 5仪器设备及器具 5.1恒温水浴锅：精度为±0.1 °C。 5.2 pH计:精度为0.1 pH单位。 5.3分光光度计：波长范围380 nm-780 nm,吸光度值精确至0.001。 5.4 1 cm比色皿。 1 GB/T 34800—2017 5.5电子天平：精度为0.000 1 g 、O.01 g和0.1 g。 5.6高速离心机：最小离心力为8 000 g,具1.5 mL离心管。 6主要试剂 本方法所用试剂均为分析纯，除特殊说明外，实验用水均为GB/T 6882规定的二级水。 6.1