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PAGE 《植病研究技术》课程教学大纲 课程编号:02022 英文名称:Technique of Plant Pathology 一、课程说明 1. 课程类别 专业选修课 2. 适应专业及课程性质 植物保护专业 选修 3. 课程目的 本门课程是植保专业选修课程之一,通过学习要求学生掌握植物病害研究方法和基本操作技能,掌握文献资料的查阅和整理方法及了解论文撰写要求。 4. 学分与学时 学分为1.学时为24 5. 建议先修课程 微生物学、普通植物病理学、农业植物病理学等 6. 推荐教材或参考数目 推荐教材: 《植病病理学实验技术》(第一版).孙广宇,宗兆锋主编.农业出版社.2002年 参考书目: 《植病研究法》(第三版).方中达编著.农业出版社.2002年 7. 教学方法与手段 (1)采用启发式、讨论式、研究式、互动式等授课方式,充分发挥学生的主体作用 (2)提高授课技巧,授课以“问题解决式”为主,注重知识的连贯性 (3)多种教学方式紧密结合,融为一体 (4)利用多媒体教学 (5)自制或因特网下载多媒体教材 8. 考核及成绩评定 考核方式:考试 为了全面客观地反映学生本课程的学习水平,在考试上既要重视理论知识的考核,还要加强实际能力的考核。 成绩评定: (1)平时成绩占50%,形式有:平时作业,平时课堂表现,平时实验结果 (2)考试成绩占50%,形式有:问答题,论述题,选做题等 9. 课外自习要求 (1)作业按时完成,认真、整齐、不抄袭 (2)阅读相关英文科技论文24篇 二、课程教学基本内容及要求 第一章 常用培养基的配制方法及其操作技能 基本内容: (1)PDA制作 (2)牛肉膏蛋白胨制作 (3)高氏1号培养基制作 (4)培养基灭菌 基本要求: (1)了解培养基的配制原理 (2)掌握培养基的制备方法 教学重点:掌握培养基配制的操作步骤及灭菌方法 教学难点:区分不同培养基的适用范围及区别灭菌与消毒的差异 第二章 植物病原真菌研究方法 植物病原真菌的分离方法 基本内容: (1)肥厚多肉的组织(如块根、块茎、果实、蔬菜肥厚的叶柄等)内病原菌的分离 (2)茎、枝条、根的木质部或皮层组织内病原菌的分离 (3)叶片、叶柄、细根及幼苗茎内病原菌的分离 (4)种子病原菌的分离 (5)单孢子分离法 (6)细菌污染的排除 基本要求: 通过本实验了解和初步掌握植物病原真菌常用的分离技术 教学重点:掌握分离操作的一般方法 教学难点:单孢分离操作时单个孢子的挑取技术及如何避免操作污染 *植物病原真菌孢子的萌发 基本内容: (1)孢子萌发方法 (2)孢子萌发条件 基本要求: (1)了解测定孢子萌发对环境条件的要求 (2)掌握孢子萌发测定的一般方法 教学重点:掌握孢子萌发测定方法 教学难点:对于悬滴法的掌握及血球计数板的使用 植物病原真菌的接种方法 基本内容: (1)种子传染病害的接种 (2)土壤传染病害的接种 (3)气流和雨水传播病害的接种 基本要求: (1)通过把分离到的病原菌接种到植物上,诱发致病,加深对病原物传染,侵染等概念的理解 (2)掌握几种常用的接种方法,为进行致病性测定等方面的研究打下基础 教学重点:掌握不同的真菌接种方法 教学难点:针对具体的病原菌采用哪种接种方法较为适宜 第三章 植物病原细菌研究方法 植物细菌病害的室内诊断 基本内容: (1)显微镜检查 (2)涂片染色 基本要求: 掌握植物细菌室内诊断的简易方法 教学重点:掌握喷菌现象是植物病原细菌特有的;掌握革兰氏染色反应的一般方法 教学难点:了解革兰氏染色反应的基本原理 植物病原菌的常规接种方法 基本内容: (1)喷雾接种法 (2)刺伤接种法 (3)切伤接种法 (4)摩擦接种法 基本要求: 通过实验要求掌握常规的几种病原细菌的人工接种方法和熟练的操作技术 教学重点及难点: (1)重点掌握植物病原细菌的一般接种方法 (2)区分真菌与细菌的接种方法 第四章 聚合酶链式反应(PCR)检测植物病原真菌的研究方法 溶液配制 基本内容: (1)研磨缓冲液 (2)氯仿:异戊醇(24:1) (3)10X TAE电泳缓冲液 (4)6X 载样缓冲液 基本要求: 掌握DNA提取及分子生物学检测相关溶液配制方法 植物病原真菌总DNA的提取 基本内容: (1)CTAB法 (2)玻璃珠-盐析法 基本要求: 掌握植物病原真菌总DNA提取的常用方法 教学重点:弄清DNA提取原理及操作步骤;比较不同提取方法的优劣 PCR反应 基本内容: (1)反应体系配制 (2)程序设置 基本要求: 掌握反应体系配制方法及PCR仪反应程序设置方法 教学重点及难点: (1)了解PCR反应原理 (2)了解反应体系中不同试剂对反应的作用 电泳检查 基本内容 掌握PCR产物检测一般方法 基本要求: (1)制胶 (2)点
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