微分干涉显微镜实验报告.docVIP

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《形态观察技术与原理》实验报告 日期:2015年10月25日 姓名:高海艳 学号:51151300057 实验二 微分干涉显微镜的操作技术 [一、实验目的] 1、了解微分干涉显微镜的结构及其成像原理。 2、掌握使用微分干涉显微镜来进行细菌、细胞等活体观察的操作技能。 [二、实验原理] 微分干涉显微镜的特点就是能显示结构的三维立体投影影像,可使细胞的结构,特别是一些较大的细胞器,如核、线粒体等,立体感特别强,适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。 原理:偏振器(45度偏振)直接装在聚光系统的前面,使光线发生线性偏振。在聚光器中安装了即DIC棱镜,可将一束光分解成偏振方向不同的两束光(x和y),二者成一小夹角。 聚光器将两束光调整成与显微镜光轴平行的方向。最初两束光相位一致,在穿过标本相邻的区域后,由于标本的厚度和折射率不同,引起了两束光发生了相位差。在物镜的后焦面处安装了DIC滑行器,它把两束光波合并成一束,将两束互相垂直的偏振光重新组合成同一偏振方向(135度偏振),,引起光的干涉,相位差异被转换到振幅差。最后光束穿过检偏器(135度偏振片),去掉直接传送的光。通过调节DIC滑行器的纵行微调来改变相位差,从而可改变影像的亮度,可使标本的细微结构呈现出正或负的投影形象,通常是一侧亮,而另一侧暗,这便造成了标本的人为三维立体感,类似大理石上的浮雕。 [三、实验仪器]   OLYMPUS-BX51微分干涉显微镜 [四、实验步骤] 推入检偏器; 转入DIC滑行器; 转入DIC镜头,并调整DIC聚光器使之匹配(转换物镜时仍可调整孔径光阑); 推入偏振器(起偏器); 起偏器的调整:旋拧“CT镜”对焦,当看到物镜后焦点平面上的干涉条纹;再缓缓地旋转起偏镜的旋钮,至黑色干涉条纹达到相对清晰为止,固定起偏镜的小形螺丝; 转动DIC滑行器,调整效果进行观察。 [五、实验结果] 原生动物观察结果如下:

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