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牛采精架的构造 牛精子活力检查的程序 3.精液的准备 液态保存的精液活率不低于0.6,冷冻保存的精液解冻后精子活率不低于0.3。 4.输精人员准备 输精员的指甲必须剪短磨光,洗涤干净,用75%的酒精消毒,同时手臂也应消毒并涂以稀释液或生理盐水作润滑剂。在条件允许的情况下,输精员最好戴手套进行操作。 二、输精的基本要求 输精的技术要求包括输精量、输精时间、输精次数以及输精部位的确定。在进行人工授精时,动物的种类不同,对输精的要求也就有所不同。 一般情况下,各种动物都适宜在排卵前的4~8h进行输精。在生产中,常用发情鉴定来判定适宜的输精时间。 子宫内 马15~30mL,驴10~20mL,有效数2.5亿 卵泡成熟末期,排卵后再配一次 发情开始后第4d 发情停止前1~2h 马驴 子宫颈内浅部 0.05~0.2mL,有效数目5000万个 发情时输一次,隔一天再输一次。根据试情程度决定 就在此时 发情结束时 绵羊:开始后20~30h; 山羊:开始后30~40h 羊 子宫内 30~40mL,冻精10mL,精子数20~30亿个 压背站立不动时,第二天再补输一次 排卵前6h 发情开始后24~36h 猪 子宫颈深部 1~1.5mL,有效精子数不少于1千万个 早上发情,下午输精,并进行二次输精(第二天早上) 排卵前7~8h 发情结束后10h左右 牛 输精部位 输精量 实际输精时间 理论输精时间 排卵时间 品 种 4.其它类物质 ①酶类:乳酸脱氢酶,细胞色素氧化酶,琥珀酸脱氢酶,β-葡萄糖苷酸酶,谷草转氨酶,过氧化氢酶,粘蛋白酶等。 ②激素:催产素,PGE2,PGF2α,T等。 ③维生素:VC,VB2,B12,VE等。 酶类、激素类、维生素类等,有助于调节和改善精子外在环境的理化特性,以及母畜生殖道的生理机能,以利于提高受精机会,促进合子发育。 ④常温保存时通入CO2可延长保存时间。 ⑤在颗粒精液中加入染料用作标志等。 三、稀释液配制的注意事项 1.消毒:配制好的稀释液,瓶口用硫酸纸包好,外用布盖上,扎紧,置高压锅中,0.8kg、105℃的压力维持30min;糖类稀释液只能用0.5kg的压力,或用水煮沸30min即可。 2.用于配制稀释液以及封装保存精液的一切用品,都必须消毒,使用前再用稀释液冲洗2~3次。 3.稀释液应新鲜、无菌,现用现配。 4.在稀释液中加入卵黄、奶类及抗菌素等药物应在稀释液降温到35℃以下时再加入。 5.稀释液加入卵黄和抗菌素前应过滤。0.02~0.2 μm滤膜。 6.成本低,配制方便,精子存活率高,受胎率高。 四、精液的稀释 (一)稀释液的种类 根据性质和用途可分为4类。 1.现用稀释液:适用于采精后立即授精,以单纯扩大精液容量,增加输精母畜头数为目的。此类型稀释液以简单的等渗的糖类和奶类为主体。 2.常温保存稀释液:适用于精液在常温下作短期保存,具有以糖类和弱酸盐为主体的pH偏低的特点。 3.低温保存稀释液:适用于精液低温保存,具有含卵黄或奶液为主体的抗冷休克特点。 4.冷冻保存稀释液:适用于精液超低温冷冻保存,具有甘油、二甲亚砜等抗冻物质为主体特点,此类稀释液比较复杂,有仅一种稀释液组成,也有由多种稀释液组成。 (二)精液稀释的方法 1.先将稀释精液所用的器具加温到30~35℃,并用等温稀释液冲洗2~3次(防止温度和渗透压的损害)。 2.新采集的精液及时稀释,室温低于20℃时,要用精液无菌保温箱。精液放置时间过长则会降低精子活率,一般在0.5h内进行稀释。 3.稀释液与精液的温度必须一致,可用消毒温度计测量。采精时集精杯加保温措施,稀释液预先加温到30℃左右,置于精液保温箱中。 4.在稀释精液时,将稀释液沿杯壁缓缓加入精液中,一般将稀释液与精液置于预定温度的保温瓶中作等倍稀释处理。然后轻轻转动精液瓶或用灭菌棒搅动,使之混匀。 5.如果进行低倍稀释(3~5倍)可一次完成,若高倍稀释时则须分两步进行,即先低倍稀释,防止精子所处的环境突然改变,对精子造成打击。间隔1.5~2h后,精液降至保存(平衡)温度时,进行二次稀释。 6.精液稀释后,先静置片刻,再做活率检查,如果活率没有变化,则分装保存。如果活率下降,则说明稀释或操作不当,不宜使用,并检查原因。 (二)稀释倍数 精液的稀释应保证每输精剂量所含直线前进运动的精子数不低于输精标准要求。精液适宜的稀释液应根据以下依据决定: 1.稀释液种类:糖类稀释液→低倍稀释,奶类稀释液→高倍稀释。 2.保存时间:时间长→高倍稀释,时间短→低倍稀释。 3.精液保存方法:冷冻保存稀释倍数应低一些,而液态保存稀释倍数可高些。 4.畜种:羊、牛、鹿精子密度大,稀释的倍数
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