微生物培养检验技术.pptVIP

肉毒梭状芽孢杆菌的检验 最严格的厌氧菌。 普通琼脂上形成灰白色，半透明、边缘不整齐。呈绒毛网状、向外扩散的菌落。 血液琼脂上菌落周围有溶血区； 卵黄琼脂平板上生长时，菌落及其周围培养基表面覆盖着特有的虹彩样薄层。G型没有 金黄色葡萄球菌的检验 样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。 增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或胰蛋白肉汤中，37°C培养24小时。 分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37°C培养24-48小时。 金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。 在Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2-3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。 染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。 血平板 Baird-Parker平板 蛋及蛋制品：沙门氏菌、葡萄球菌、变形杆菌等 水产品海产品：链球菌、副溶血性弧菌 乳制品：沙门氏菌、志贺氏菌、葡萄球菌、链球菌、蜡样芽胞杆菌 畜禽肉类：肠道致病菌和致病性球菌 米面类：蜡样芽胞杆菌、变形杆菌、酵母霉菌等 罐头：耐热性芽胞杆菌、嗜热脂肪杆菌、大芽胞杆菌、凝值芽胞杆菌 二、真菌学检验 （一）霉菌的测定 1、稀释培养法 测全菌 固样——捣碎稀释 粉样、流体样——混合稀释 2、显微镜直接镜检法 ①血球计数器计数法 ②视野计数法 吸管、载片、盖玻等彻底消毒，用吸管准确测出1ml菌液的滴数，并滴一滴于载玻片上，盖盖玻片（菌液不外溢或发生气泡），在显微镜下按下列顺序检视10个视野，记录每个视野菌数，求出平均数，再用测微尺测定视野直径，求出视野面积，同时算出盖玻片面积，则： 每克样品带菌量=C/R.M.L.D/W (二）酵母菌总数的测定 1、稀释法 混合稀释、捣碎稀释 2、镜检法 血球计数板计数法、视野计数法 三、其他微生物检验 微生物指标还应包括病毒，肝炎病毒、猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、马立克氏病毒、口蹄疫病毒，狂犬病病毒，猪水泡病毒等； 另外，从食品检验的角度考虑，寄生虫也被很多学者列为微生物检验的指标：如旋毛虫，囊尾蚴，住肉孢子虫、蛔虫、肺吸虫、弓形体、螨、姜片吸虫、中华分枝睾吸虫等等 微生物检验流程图 无菌取样 样品均质 样液稀释 样品接种 恒温培养 结果观察 思考题： 1、进行微生物检验时，对样品的采集有何要求？ 2、感官检验样品的卫生质量时，从哪几个方面入手？ 3、怎样进行粒状样品内部菌的检测？ 4、什么是大肠菌群？为什么以大肠菌群作粪便污染的指示菌？如何检测？ 5、为什么进行致病性细菌检测时，样品需要增菌培养？病原性大肠杆菌、肉毒梭菌、金黄色葡萄球菌三种致病菌的分离平板各是什么？形成的菌落有何特征？ （补充章节） 食品的特点 1、有丰富的营养物质 微生物进行正常的生理活动和生长繁殖,首先要有适当的营养条件,如碳源 氮源 无机盐类和生长素,碳源是构成菌体成分重要元素… 2、含有一定量的水分 菌体所需的营养物质要成为水溶液状态才能被吸收…… 3、常具有天然防御结构和抑菌物质 食品微生物来源及污染途径 食品微生物来源：土壤、空气、水、人和动物 土壤 粮食、蔬菜和水果等植物性食品最易受到土壤中微生物的污染。以细菌最多，其次是放线菌、霉菌与酵母菌。 空气 在空气中，有时会出现一些病源微生物，如结核杆菌和金黄色葡萄球菌等病原菌，可通过污染的食品而引起感染。 水 水是一种污染源，淡水中常见的微生物类群有：假单胞菌属、无色杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属等菌种。海水中主要是副溶血弧菌，是人类吃海产品而引起食物中毒的病原菌… 人与动植物 人与动植物体表、人与动物的消化道和上呼吸道均有一定种类的微生物丛存在，该微生物如果污染了食品，常引起腐败变质。当人与动物有致病微生物侵入机体而致病时，体内的病原菌就会随粪便和分泌物排出体外，如处理不当，直接或间接污染食品，造成对人的危害…… 工具与容器 … 微生物危害 美国，每年约有7200万人发生食源性疾病，造成3500亿美元的损失 80年代，上海，毛蚶，甲型肝炎爆发，累及30万人 1999年，宁夏，沙门氏菌污染肉品，食物中毒暴发，发病人数上千人 2001年，江苏、安徽等地，肠出血性大肠杆菌造成177人死亡，中毒人数超过2万人 采样：指从待检物中采取少量具代表性的样品供分析检验用。 样品种类 样品种类可分为大样、中样、小样三种。大样系指一整批，中样是从样品各部分取得的混合样品，小样系指做分析用，称为检样。检样一般以25g为准，中样以200g为准。 采样用具：