甲基睾丸酮在罗非鱼体内的消解规律及其检测方法的研究-食品科学专业论文.docxVIP

Dissertation Dissertation for the Master’S Degree STUDY oN THE DISSPATIoN oF 1 7a．METHYLrllESToSTERoNE AND HPLC DETERMINATIoN oF ITS RESIDUES IN NILE TILAPIA Candidate： Zou Qin Supervisor： Prof．Li Liudong Prof．Qin Xiaoming C ．K Agriculture e a ：6t小k Utilization of Marine Bioresources V e m瞄磷 比 Guangdong Ocean University 裟i{哪n 豁妒：雪岍．虿|m d砒 April 2010 一√ 一√ 广东海洋大学 广东海洋大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得 的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承 担。 作者签名：印谬 20 p年多月∥日 f 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权广东海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于l、必威体育官网网址口，在——年解密后适用本授权书。 2、不必威体育官网网址团。 (请在以上相应方框内打“4”) 作者签名：研移 硷lO年6目ls B 导师签名：孝‘文旁 20 l o年6月If日 J J 甲基睾丸酮在罗非鱼体内的消解规律及其检测方法的研究摘要 甲基睾丸酮在罗非鱼体内的消解规律及其检测方法的研究 摘要 本研究采用建立的罗非鱼各组织、鱼苗体内甲基睾丸酮残留的检测方法，对大规 模养殖环境条件下，使用甲基睾丸酮后在罗非鱼鱼苗和成鱼体内的残留消除规律进行 了系统研究，旨在为行政主管部门制定监督管理措施及罗非鱼药残监督溯源提供理论 依据。 首先通过比较筛选国内外相关研究，建立了适合于罗非鱼各器官组织及其鱼苗中 甲基睾丸酮残留测定的高效液相色谱法。样品经乙醚超声波提取、石油醚净化(血浆、 胆汁中辅以固相萃取柱萃取)，然后以ODS．C18柱，77％甲醇溶液洗脱分离，紫外检 测器检测、外标法定量。该前处理方法能使目标物在色谱图上有合适的保留时间、峰 型好、目标峰与杂质峰完全分离，该法甲基睾丸酮浓度在0．040肛灿10．Opg／mL范 围内线性关系良好(∥=1．oooo)，样品检出限分别为：背肌、腹肌8pg／kg，鱼皮、肝脏 27119／kg，性腺80prdkg，血浆、胆汁80I．tg／L，鱼苗20I．tg／kg。方法的回收率不低于80．6％， 血浆、背肌、腹肌、鱼苗、胆汁、肝脏、鱼皮、性腺的回收率分别为91．4％、88．O％、 87．4％、88．9％、87．6％、83．6％、80．9％、80．6％。相对标准偏差不高于5．53％，鱼苗、 肝脏、血浆、背肌，胆汁、性腺、腹肌、鱼皮分别为2．51％、3．59％、3．68％、3．96％、 4．51％、4．49％、4．91％、5．53％。适用于罗非鱼组织中甲基睾丸酮的检测，同时为开 展甲基睾丸酮在罗非鱼体内残留消解规律的研究奠定了基础。 接着运用建立好的高效液相色谱法检测鱼苗体内的甲基睾丸酮的方法，研究了养 殖场大规模养殖下，甲基睾丸酮用于尼罗罗非鱼苗雄性化后在苗种体内的消解规律。 分别采用含200mg／kg、50mg／kg、20mg／kg甲基睾丸酮的饲料持续喂养尼罗罗非鱼苗 30d来进行雄性化，随后鱼苗转移到池塘来进行甲基睾丸酮的消解实验，应用高效液 相色谱法检测不同时间鱼苗体内甲基睾丸酮的残留量，并用SPSS Statistics 17．0统计 软件结合EXCEL 2003进行数据处理和分析，来研究甲基睾丸酮的消解规律。结果 表明，两次投喂间甲基睾丸酮在罗非鱼体内是缓慢减少的且出现多峰现象，但是在罗 非鱼雄性化期间甲基睾丸酮在罗非鱼体内具有一致性。此外，停药后甲基睾丸酮的消 解基本符合指数递减，虽然甲基睾丸酮雄性化效果确实很好，但是甲基睾丸酮后期消 解较为缓慢，且甲基睾丸酮浓度越大，在罗非鱼鱼苗体内残留时间也越长。若养殖户 私下使用过量甲基睾丸酮来用于罗非鱼的雄性化，或者在鱼苗雄性化之后使用甲基睾 丸酮的话，很难在上市之前完全代谢掉，那么消费者食用后就很可能对身体造成一定 的危害。因此强烈建议