广州及周边地区蝙蝠携带sars（样）冠状病毒、狂犬病毒和禽流感病毒的初步流行病学调查-流行病学与卫生统计学专业论文.docxVIP

博士学位论文广州及周边地区蝙蝠携带SARS(样)冠状病毒、狂 博士学位论文 广州及周边地区蝙蝠携带SARS(样)冠状病毒、狂 犬病毒和禽流感病毒的初步流行病学调查 博士研究生：李志峰 指导教师：俞守义教授 辅导教师：陈清教授 吴毅教授 摘要 研究背景：蝙蝠对人类而言是有益的动物，是一个可以与人类和谐共 处的晕要物种，但是近年束发现蝙蝠是多种人兽共患疾病病毒的储存宿主， 如近来在澳大利亚和东呱出现的尼巴病毒及亨德拉病毒。蝙蝠可以持续感染许 多病毒而不表现临床症状。sARs首先在广东爆发，尽管先前对这种新病毒的 致病性和分子特征的研究取得了成功，但仍没有找到SAI塔冠状病毒的来源。 流行病学调查及果子狸体内检测到SARS样病毒，表明SARS冠状病毒(serve acute respiratory syndrome—associated eoronavirus，SARS．CoV)可能来自野生 动物，但随后的调查发现感染在野生或人工饲养的果子狸并不常见，而且果 子狸在感染两种不同的SARS—CoY人分离株后，表现出明显的临床症状，提 示果子狸可能不是SARS．CoV的自然宿主。果子狸可能只是SARS．CoV的中 间宿主，SARS—CoV有可能是从别的野生动物(如在野生动物市场的野生动物) 传播给果子狸。广东地区有食用果蝠的现象，野生动物市场每天汇集来自广卅I 中文摘要及周边地区的捕捉的果蝠，然后再分销至广州及周边城市的酒店和茶楼。这样 中文摘要 及周边地区的捕捉的果蝠，然后再分销至广州及周边城市的酒店和茶楼。这样 就造成或增加了野生动物之间和野生动物与人接触的机会，也就增加了一些疾 病在野生动物之间及在野生动物与人之间传播的可能，使得某些疾病跨物种传 播成为可能。若果蝠携带SARS冠状病毒就有可能将SARS冠状病毒传染给人 或其它动物(比如果子狸)，果蝠有可能是SARS-CoV和SARS样冠状病毒 (SARS-1．ke-CoV)冠状病毒的自然保菌宿主之一。研究发现蝙蝠与狂犬、乙 脑等发病有一定的关系。禽流感病毒主要自然储存宿主是禽类，但是否还存 在其他野生动物自然宿主，如果蝠，还有待于进一步调查研究。广州及周边 地区气候属于亚热带气候，蝙蝠种类、数量较多，但目前缺乏上述地区蝙蝠 较详细的研究资料，尤其是果蝠可能携带的病毒以及与人类疾病、健康之间 的关系和流行病学调查研究几乎空白。因此有必要对广州及周边地区的蝙蝠 种类、分布、数量、生态习性等开展调查，对果蝠及其它蝙蝠可能携带SAR S (样)冠状病毒(SARS(一like)一CoY)、狂犬病毒(Rabiesvirus，RV)与禽流感 病毒(Avian influenza virus，AIV)的情况开展流行病学调查。 研究目的：1．对广州市及周边地区的蝙蝠种类、分布、生态习性等开 展初步调查，为进一步深入开展该地区蝙蝠可能携带的重要传染病病毒及与 当地人群之间的健康、疾病之间的关系的流行病学调查奠定基础。 2．对广州及周边地区和广州野生动物市场的蝙蝠携带SAR S(样)冠状病 毒的情况开展流行病学调查，为进一步阐明SARS源头及传播链提供线索。 3．对广州及周边地区和广州野生动物市场的蝙蝠携带狂犬病毒和禽流感 病毒的情况开展流行病学调查，为狂犬病和禽流感疾病的预防提供更全面的 理论依据。 研究方法：1．调查，走访、请教国内研究蝙蝠的专家教授，获取广州 及周边地区蝙蝠的种类、分布、生态习性等资料。 2．在调查地区开展现场调查，了解是否有蝙蝠存在、蝙蝠的种类及与当地 人群疾病、健康等可能存在的关系。 II 博士学位论文3．对广州的野生动物市场开展调查，了解野生动物市场私自销售的蝙蝠种 博士学位论文 3．对广州的野生动物市场开展调查，了解野生动物市场私自销售的蝙蝠种 类、数量、来源及分销地点。 4．捕捉蝙蝠，采集标本，并请研究蝙蝠的动物学专家对蝙蝠种类进行鉴定， 对蝙蝠可能携带的SAR S(样)冠状病毒、狂犬病毒和禽流感病毒采用细胞培 养、RT-PCR、荧光PCR、基因芯片等多种方法进行病源学检测，检测过程严格 质量控制。 质量控制：1．本次调查强化全程质量控制措施，标本与阳性对照采用 统一的检测方法。 2．标本取材新鲜，采用病毒保存液制备病毒悬液，减少病毒可毹的损失。 提取的RNA经检测表明纯度较高，完整性好，含量较高。 3．分子生物学检测采用多对引物同时检测，降低了不同引物扩增效率不同 的影响。除了阳性对照、阴性对照和空白对照，还设立了模拟对照，以排除 标本和病毒保存液可能对RNA的提取、RT-PCR检测的干扰。优化检测反应条 件。 4．上述实验对照全部成立，试验条件稳定重复性好，说明检测方法可靠。 5．为减少系统误差，减少检测的假阴性，对部分标本还采用并联检测法和 重复一次检测。 通过上