果蔬中赤霉素检测方法的研究现状【文献综述】.docVIP

毕业论文文献综述 食品质量与安全 果蔬中赤霉素检测方法的研究现状 摘 要：赤霉素是广泛应用于工农业生产各领域的一种植物激素，其残留过量则会对人体造成危害。目前我国还没有建立关于赤霉素的国际标准。本文介绍了我国果蔬出口国的赤霉素含量的要求，分析了传统检测赤霉素方法的缺点，并重点介绍了目前用于果蔬中赤霉素的检测方法及其研究现状。 关键词：赤霉素；检测；高效液相色谱 赤霉素是一种广谱性植物生长调节剂，几乎在植物生长、发育的各个阶段都起着调节作用。赤霉素在植物体内的形成部位一般是嫩叶、芽、幼根以及未成熟的种子等幼嫩组织。1926年日本病理学家黑泽在水稻恶苗病的研究中发现水稻植株发生徒长是由赤霉菌的分泌物所引起的。1935年日本薮田从水稻赤霉菌中分离出一种活性制品，并得到结晶，定名为赤霉素（GA）。第一种被分离鉴定的赤霉素称为赤霉酸（GA3），现已从高等植物和微生物中分离出70余种赤霉素。 图1 赤霉素的结构图 赤霉素中生理活性最强、研究最多的是GA3。它能显著地促进植物茎、叶生长，特别是对遗传型和生理型的矮生植物有明显的促进作用；能代替某些种子萌发所需要的光照和低温条件，从而促进发芽；可使长日照植物在短日照条件下开花，缩短生活周期；能诱导开花，增加瓜类的雄花数，诱导单性结实，提高坐果率，促进果实生长，延缓果实衰老。除此之外，GA3还可用于防止果皮腐烂；在棉花盛花期喷洒能减少蕾铃脱落；马铃薯浸种可打破休眠；大麦浸种可提高麦芽糖产量等等。 赤霉素作用广泛[1,2]，但属于低毒植物生长调节剂，当大量使用时会产生一定毒性。我国目前还没有相关的国家标准，有必要建立高灵敏、快速的赤霉素残留检测方法。 1 国内外赤霉素限量要求 根据日本肯定列表最终数据查询??(2006年5月29日起实施) 暂定?菠菜、菠萝、草菇、草莓、橙(包括脐橙)、葱(包括韭葱) 大白菜、大蒜、豆瓣菜、鳄梨、番木瓜、番茄、番石榴、繁殖洋葱等使用的最高限量MRL为0.2 ppm。美国(USA )允许苹果中的农药残留限量要求（1999年3月15日）联邦法律条款（40 CFR 120）赤霉素残留限量（Tolerance, ppm）为0.5。中国台湾2007年2月1日公布了有关食品内杀虫剂残留限量草案以及拟撤消杀虫剂最大残留限量(MRLs)遗漏名单中的杀虫剂，草案对芹菜内的赤霉素(gibberellicacid)也规定了最大残留限量。 在国内关于赤霉素检测的标准有以下两个：①SN 0350-1995出口水果中赤霉素残留量检验方法（Method for the determination of gibberellic acid residues in fruits for export），此为行业标准，主要采用方法为荧光分光光度计法；②DB11/ T 379-2006 豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的测定，此为北京地方标准，主要采用方法为HPLC-DAD法。但是，目前还未建立相关的国家标准。 2 果蔬中赤霉素的检测方法 赤霉素的测定方法主要有三大类：生物鉴定法、免疫法和物理化学法。生物鉴定法灵敏度虽高，但准确度不很好，且操作费时[3]；免疫法的准确度和灵敏度很高，但因制备抗体复杂而难以推广[4]。常见的理化测定法主要有荧光比色法、紫外分光光度法、溴酸钾滴定法[5]、福林反应法[6]、2,4-二硝基苯肼比色法[7]、磷钼杂多酸法[8]等。荧光法[9,10]是GA测定的经典方法，但该法操作过繁，试剂消耗量大，且需要真空泵及冰浴等条件；紫外分光光度法的准确度都易受杂质的干扰而降低；溴酸钾滴定法选择性较差，不能用于发酵液中赤霉素测定。而且这些方法都只能检测同系混合物的总量，不能分辨各有效成分，尤其是GA3含量，因此不符合检验标准，特别是不能满足出口检验要求。 随着色谱仪、质谱仪的出现，很大程度上解决了这一大难题。质谱分析仪具有高灵敏度和选择性，因此是检测植物激素最有效的检测器。最近几年，LC–ESI-MS/MS已被用于检测植物样品中的IAA和ABA，但是被用于检测GA3的报道比较少[11]。国内外对果蔬原料中的赤霉素进行定性和定量的研究常采用HPLC法、GC-MS法、LC-MS法等方法。 2.1 高效液相色谱法 高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法。在70年代末，高效液相色谱开始逐步用于检测除乙烯以外的植物激素。国外研究者那时也开始研究用高效液相色谱仪来分离检测赤霉素组份的含量了。Reeve等人在把赤霉素各组份的羧基酯化后，再用高效液相色仪来分离其酯化衍生物。Lin J.T.等则是用反相高效液相色谱技术来直接分离赤霉素各组份。实验证明[12]高效液相色谱对赤霉素的定性、定量测量是准确可靠的。