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毒性中药钩吻配伍玉叶金花减毒机制研究中西医结合基础专业论文
2.3数据统计分析
2.3数据统计分析 ..13
3结果 .. 13
3.1对小鼠扭体实验的影响 13
3.2对小鼠热板实验的影响 13
3.3对福尔马林致痛实验的影响 ..15
4讨论 .. . ........... ... ...............15 小结 ... .. .... ... ..... .....15
第二部分钩吻配伍前后对药物转运的影响 1 7
l引言 ... ..... ... . .... . 17
2实验路线图 ..17
实验一钩吻毒/效部位转运前成分稳定性分析 ..1 8
l材料..... . . ... .18
1.1实验仪器 . ..18
1.2实验试剂 18
1.3实验药材 ... . . . . ..19
2方法 .. .. . .. ...... ...............................19
2.1钩吻毒/效部位的制备 . .. . .. .19
2.2钩吻毒/效部位稳定性分析 19
2.3钩吻毒/效部位的UPLC—MS/MS分析 . . ... ..19
3结果 .. ... .... ...... ..20
3.1钩吻毒/效部位稳定性分析 20
3.2钩吻毒/效部位的UPLC—MS/MS分析 .. . .21
4讨论 . . .. ...... .......... ........... .23 实验二钩吻配伍前后在Caco-2细胞中的转运机制研究 ..25 1材料 ..25
1.1实验仪器 . .. . . .25
1.2实验试剂 25
1.3实验药材..... ... ..... ... ..26
1.4细胞 . .. . 26
1.5主要试剂的配制 26
2方法 . .. ..26
2.1 Caco-2细胞的培养. . . .26
2.2 MTT法检测试药细胞毒性 ..26
2.3钩吻配伍前后跨膜转运机制研究 .27
2.4数据统计分析 . .28
3结果...... .. . .. ... .. .. ........28
3.1 Caco-2细胞模型的评判 . .. .. .28
3.2 MTT法检测试药细胞毒性 ..28
TTT
万方数据
3.3跨膜转运机制研究
3.3跨膜转运机制研究 .29
4讨论 ..34
小结 ..... ...... .... .... . . .34
第三部分钩吻配伍前后对药物转化的影响 37 1引言.. .. ... .... ....... . . 37
2实验路线图 ... ....... ... . .. . ...37
实验一钩吻配伍前后对I相代谢的影响 38
1材料 ..38
1.1实验仪器 38
1.2实验试剂 38
1.3实验药材 39
1.4实验动物 40
2方法 .. 40
2.1药物的制备 . 40
2.2分组与给药 ... . 40
2.3样品的处理 .40
2.4 RT-PCR法测定肝脏组织中基因CYP2EI、CYPIA2 mRNA的表达 .40
2.5 WesternBlot法测定肝脏组织中CYP2EI、CYPIA2蛋白含量 42
2.6免疫组化测定肝脏组织中CYP2EI、CYPIA2蛋白的表达 44
2.7数据统计分析 . .. ..45
3结果...... .. . . .. .. .. .. ..... 45
3.1肝组织中基因CYP2EI、CYPIA2 mRNA的表达 .. .45
3.2肝组织中CYP2E1、CYPIA2蛋白的表达 ..46
4讨论 ..50
实验二钩吻配伍前后对Ⅱ相代谢的影响 52 1材料 ..52
1.1实验仪器 52
1.2实验试剂 52
1_3实验药材 53
1.4实验动物 .. .. .. . .. 53
2方法 ..53
2.1药物的制备 .53
2.2分组与给药 .. ... ... ..54
2.3样品的处理 .. .... ... . 54
2.4 RT-PCR法测定肝脏组织中基因GST—pi、GSTml mRNA的表达 ..54
2.5 WesternBlot法测定肝脏组织中GST—pi、GSTml蛋白含量 .55
2.6肝脏组织中GST酶活力测定 ..55
TV
万方数据
2.7数据统计分析
2.7数据统计分析 . .55
3结果 .. . ...... .. . ..55
3.1肝组织中基因GST-pi、GSTml mRNA的表达 . ...55
3.2肝组织中GST-pi、GSTml蛋白的表达 57
3.3肝组织中GST酶活力测定 .58
4讨论 . .... . .... ...... .... 59 小结 .. . .. ..60
结 论 。6 1
参考文献 62
致谢
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