α-硫辛酸对2型糖尿病大鼠氧化应激致胰岛β细胞凋亡的影响-兽医学专业论文.docxVIP

上海交通大学硕士学位论文 上海交通大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 α-硫辛酸对 2 型糖尿病大鼠氧化应激致胰岛β细胞凋亡 的影响 摘 要 本文旨在探讨高糖高脂膳食与链脲佐菌素（STZ）联合诱导 2 型 糖尿病大鼠模型的可行性和诱导方案；探讨α -硫辛酸（ALA）干预处 理对 2 型糖尿病模型大鼠氧化应激致胰岛β 细胞凋亡的影响。 采用高糖高脂膳食联合单次腹腔注射 40mg/kg?BW STZ 构建 2 型 糖尿病大鼠模型；将实验动物随机分成六组：阴性对照组、阳性对照 组和 ALA 干预组（即 15mg/kg?BW 组、30mg/kg?BW 组、60mg/kg?BW 组 和 120mg/kg?BW 组），并分三阶段处死动物（4w，8w，12w），收集标 本；测定各组大鼠氧化应激指标：丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物 酶（GSH-PX）、活性氧簇（ROS）的含量和总超氧化物歧化酶（T-SOD）、 过氧化氢酶（CAT）的活性，以及实验大鼠的空腹血糖（FBG）、糖化 血红蛋白（HbA1C）、空腹血清胰岛素（F-INS）、甘油三酯（TG）、总 胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）等的变化 情况；病理组织学检查各阶段实验大鼠胰腺组织结构的变化；用 TUNEL 法检测各组大鼠胰岛β 细胞凋亡的情况，并采用蛋白免疫印迹法 （western blotting）检测大鼠胰腺组织中凋亡相关因子 Bcl-2 和 Bax、Fas 和 Fas-L，以及 Caspase-3 和 Caspase-9 蛋白表达水平。 结果显示高糖高脂膳食联合单次腹腔注射 40mg/kg?BW STZ 可成 功诱导 2 型糖尿病大鼠模型，成模率为 87.91%，而且在后续的研究 过程中模型大鼠的各项糖尿病体征较为稳定。生化指标结果：ALA 干 预后，与阳性对照组大鼠相比，各 ALA 干预组大鼠的 FBG、HbA1C、 TG、TC 和 LDL-C 的水平均有一定的下降趋势，F-INS 的含量则有所增 加，其中以 60mg/kg?BW 干预组效果最为明显。病理组织学检查：ALA 干预后，各干预组大鼠与阳性对照组相比，对于由 2 型糖尿病所引起 的胰岛细胞的萎缩、体积的减小和细胞数目的减少均有一定程度地恢 复。氧化应激指标结果：与阴性对照组相比，2 型糖尿病模型大鼠血 清和胰腺组织中 ROS 和 MDA 含量显著增高，T-SOD、CAT 和 GSH-Px 水 平则显著降低；ALA 干预后，与同阶段阳性对照组相比，各干预组大 鼠血清和胰腺组织中 ROS 和 MDA 呈现不同程度的降低，同时 T-SOD、 CAT 和 GSH-Px 水平出现不同程度的上升，且与干预时间的长短均存 在一定的相关性。胰岛细胞凋亡的结果：与阴性对照组相比，2 型糖 尿病模型大鼠胰岛细胞的凋亡指数显著增高；ALA 干预后，各干预组 大鼠胰岛细胞的凋亡指数与同阶段阳性对照组相比均出现不同程度 的降低，且呈现干预时间依赖性关系。胰腺组织中凋亡相关蛋白的表 达水平：与阴性对照组相比，2 型糖尿病模型大鼠胰腺组织中 Bax、 Fas、Activated Cas-9 和 Cas-3 蛋白表达水平均显著增高，而 Bcl-2 和 Procaspase-9 蛋白表达水平则显著降低；ALA 干预 12w 后，与同 阶段阳性对照组相比，各干预组大鼠胰腺组织中 Bax、Fas、Activated Cas-9 和 Cas-3 蛋白表达水平均出现不同程度的降低，Bcl-2 蛋白表 达水平则有所增高。 研究发现高糖高脂膳食联合单次腹腔注射 40mg/kg?BW STZ 可成 功诱导 2 型糖尿病大鼠模型，ALA 干预处理可通过增强 2 型糖尿病大 鼠机体内的抗氧化水平，有效降低模型大鼠胰腺组织的氧化损伤程度， 同时，ALA 还可通过调节凋亡相关蛋白的表达水平，在一定程度上降 低模型大鼠胰岛细胞的凋亡水平，并最终缓解 2 型糖尿病模型大鼠的 症状。 关键词： α -硫辛酸，2 型糖尿病，氧化应激，胰岛β 细胞凋亡 Effect of Alpha- lipoic Acid on O xidative Stress Caused Pancreatic Islet Beta Cell Apoptosis In Type 2 Diabetic Rats Abstract To find out the possibility of making atifical type 2 diabetic rat model induced by high fat and high sugar diet and streptozotocin (STZ). To determine beneficial effect of a