樱桃离体培养研究进展.docVIP

樱桃离体培养研究进展 山东农业科学ShandongAgriculturalSciences2005年第6期 樱桃离体培养研究进展 郑红军,刘庆忠 (山东省果树研究所,山东泰安271000) 摘要:本文着重介绍了茎尖,茎段培养在樱桃上的应用,茎尖,茎段培养的技术要点及主要影响因素,组 培苗的生根培养及驯化移栽,以及樱桃叶片,不定根和幼胚离体培养的研究进展.并对樱桃离体培养存在的问 题和不足提出了三点建议. 关键词:樱桃;离体培养 中图分类号:$662.9文献标识号:A文章编号:1001-4942(2005)06?0069-04 樱桃(Prunus)的离体培养研究始于2O世纪8O年 代[.?,经过2O多年的发展,目前已在茎尖和茎段培养, 叶片离体培养,不定根培养,胚培养等方面取得了重要进 展. 1茎尖,茎段培养 1.1应用 在樱桃的离体培养中.以茎尖,茎段作为外植体最为 广泛.目前已在Colt,SD一13,Gisela等砧木[],甜樱 桃红灯,莫利,大紫等15个品种[,乌克兰大樱桃[], 中国樱桃乌皮[2,中华矮樱桃[2,草原樱桃希望和阿泰 斯卡娅【.=]及酸樱桃[2上培养成功.有的被应用于培育无 病毒苗木,快速繁殖及建立试管苗无菌体系的实践中. 采用茎尖,茎段培养可以在短期内大大提高繁殖率. 在MS培养基上.pH为5.8时乌克兰大樱桃继代培养45 天左右,增殖系数可达11C].草原樱桃培养3O天后,增殖 系数高达5.6C..莫利甜樱桃继代培养45天增殖系数可 达1O.4C.乌皮樱桃在MS和FH培养基中继代培养3O 天.增殖倍数在7～12之间[.. 茎尖,茎段培养是培育无病毒植株的一个重要途径. 樱桃病毒病普遍而严重,并且还不能彻底脱除.2O世纪 9O年代以后大量采用热处理和茎尖培养相结合培育无病 毒苗木的方法在樱桃上得到了广泛的应用[2. 在果树育种中用茎尖,茎段培养的方法可大大缩短 育种年限.据研究,樱桃茎尖培养有5～7的试管苗 可以诱导发生变异[1,利用这些变异进行果树营养系选 种具有重要意义.宁淑香等[g]已建立了6种樱桃砧木的 无性系.无性系的建立,可以为樱桃生产提供大量整齐 一 致,抗病抗寒的优良砧木.为樱桃生产的工厂化育苗奠 定了基础.同时,也为樱桃提供脱毒苗.培育抗寒高产优 质的苗木提供了前期基础. 1.2茎尖,茎段培养的技术要点及影响因素 1.2.1品种大多数植物组织培养时外植体的诱导及 试管苗生根,不同种类品种,不同无性系间均存在一定差 异.宁淑香等[1]发现,6种樱桃砧木在同一培养基中分化 收稿日期;2005—04—01 存在着差异. 1.2.2取材及接种时期不同取材时期及接种时期影 响茎尖培养成活率.覃兰英等[2]试验表明:樱桃休眠后 取材,其成活率均高于生长期,休眠前期.王然等【=报 道,矮樱桃在3～5月取材.只需进行一次消毒,外植体的 污染率可控制在8.3以下,且在继代培养时.芽的增殖 情况优于其它时期取材的芽.代红艳等[1试验认为甜樱 桃夏季取材,可供接种的茎尖数较少,但成苗率较高 (27.3～37.5);冬季取材,枝条上可供接种的茎尖数 较多,但成苗率低(8.3～23.7). 1.2.3外植体的选择在茎尖,茎段培养中.由于品种 不同,选材有所不同.矮化砧木SD一13C,Colt【],日本 抗寒砧木北海道[],中华矮樱桃[.,莫利甜樱桃[],乌克 兰大樱桃[皆取萌动芽枝条或嫩梢作外植体培养成苗; 草原樱桃于越冬前和早春萌芽前取1年生枝条上的腋 芽∞],甜樱桃红灯,大紫,雷尼尔等[],XephyeC],毛樱 桃[皆取冬季休眠芽作外植体,乌皮樱桃[2,大樱桃矮化 砧木GiselaCo]取休眠枝条作外植体培养成苗.这些研究 表明.不同的樱桃品种茎尖,茎段培养所选用的外植体材 料不同.这是由不同品种的生理特性所决定的. 1.2.4外植体的消毒消毒方法因植物材料的种类和 采集时期不同而不同,但一般的方法为:①外植体的前处 理,即将外植体浸入稀释的肥皂液中浸泡,再用软刷或油 画笔轻轻刷洗外植体表面,除去外植体表面的尘土和部 分菌体,然后用自来水冲洗.除去皂液和污物[2.②接种 前的消毒,先用7O～75乙醇浸蘸1O～50s,再用 0.1HgCI2浸泡5～10min,最后用无菌水冲洗4～5次. 用0.1HgCI.在消毒时间为5～15rain的范围内,其灭 菌效果相同,以灭菌5rain最好,且试管苗增殖比较容易. 1.2.5培养基在离体培养条件下,不同的植物要求不 同的培养基.同一种培养物在不同的培养基上又有不同 的表现. 茎尖,茎段培养多以MS为基本培养基,但也有L培 养基钉,Fl培养基[镐],WPM培养基,Knop培养基,sc培 养基等[钉,总的看来,MS培养基或加以改良的MS培 养基即可满足需要. 69 蔗糖是常