药物分析 第10章抗生素类药物的分析课件.pptVIP

紫红 麦芽酚 链霉胍特有反应 （或α-萘酚） 8-羟基喹啉 坂口反应 （四） α -萘酚 （四） 反应 H+ UV法 （五） IR法 （六） 庆大霉素无UV吸收 TLC法 （七） 三、 检查 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 方法 TLC中的对照品法 （BP） 1. 来源 反应中间体 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 规定控制各组分的相对百分含量 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） 色谱法 （五） 1、 TLC法 对照品对照法 2、 HPLC法 三、 含量测定 （水解） 碘量法 （一） 1. 原理 水解产物 定量过量 剩余 β-内酰胺类 ChP 反应分两步进行： 1. 水解反应 (按化学计算量进行) 2. 氧化-还原反应 (无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定) 第一步 第二步 V样空 V样 对照液 +缓冲液+碘液+回滴 +碱+酸+缓冲液+碘液+回滴 V对空 V对 2. 方法 供试液 +缓冲液+碘液+回滴 +碱+酸+缓冲液+碘液+回滴 空白试验 A、消除样品已降解产物的干扰 B、消除样品中其他消耗碘的杂质的干扰 C、消除碘挥发造成的误差 以未经水解的样品作空白测定 空白 样品 I2 Na2S2O3 I- I2 采用标准品平行对照测定 A、可消除温度、pH、操作、环境等条件的影响 B、使本法测定结果与微生物检定法一致 3. 条件 （1）弱酸性 pH4.5 碱↑ I2 → IO3- + I- 酸↑ 普鲁卡因与碘在酸性条件下会产生复盐沉淀 （2）温度 24～26℃ 温度＞38 ℃ 未水解的供试品亦消耗碘 （3）水解时间 以水解20分钟后的耗碘量最大 （4）反应时间 反应20分钟后，耗碘量随时间的变化较小，可减小含量测定的误差。 4. 特点 （1）灵敏度高 样品 : 碘 = 1 : 8 （2）反应条件、实验操作要求高 V对、V对空 V样、V样空 1份含量 加试剂次序、反应时间、滴定速度相同 4I2→8I- 5. 计算 原料 汞量法 （二） 1. 原理 （水解） 青霉素族 ChP 2. 方法 醋酸盐缓冲液 pH4.6 滴定 水解 pH4.6 滴定 样 品 以未经水解的样品作空白测定 3、 讨论 （1）以第二次滴定突跃为终点 电位法指示终点 （2）反应摩尔比 1 : 1 （3）空白试验 消除已降解产物干扰 （4）优点 不需标准品 4、 计算 精密称取含水量为0.5%的青霉素钠0.0502g，按药典方法测定总青霉素含量时，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)6.97ml。另精密称取上述样品0.5013g，按药典方法测定降解物含量时，用去硝酸汞滴定液(0.02009mol/L)1.33ml。以干燥品计算，求样品中青霉素的含量。(去硝酸汞滴定液的理论浓度为0.02mol/L) homework 酸碱滴定法 （三） 1、 原理 △ （钠盐） β-内酰胺类 ChP △ 2、 方法 3、 讨论 （1）水解前先中和溶剂和样品 （2）加热时避免吸收CO2 △ 不能使酚酞变红 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速，不适用于有残留酯的产品 （水解） 可见-紫外分光光度法 （四） 1、 酸水解法（铜盐法） （1）原理 稳定剂 JP 青霉素族 （2）计算 2、 硫醇汞盐法 （1）原理 （咪唑） 青霉素族 ChP 咪唑 （2）方法 对照品法 计算 pH 9 （3）讨论 a. 咪唑催化的水解产率高，硫醇汞盐稳定（≥3h） b. 侧链有-NH2时，需加醋酐先将其乙酰化后才能发生上述反应 pH9 （4）特点 A、简便快速 B、用标准品对照，重现性良好，RSD≤1% HPLC法 （五） 特点 快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测） 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素 链霉素 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元 糖 链霉双糖胺 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺 庆