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革兰阳性需氧杆菌及检验 教学要求 掌握白喉棒状杆菌的生物学特性、临床意义和微生物学检验； 熟悉炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、加特纳菌的生物学特性、临床意义和微生物学检验； 了解产单核细胞李斯特菌、红斑丹毒丝菌的生物学特性和微生物学检验。 临床常见需氧和兼性厌氧革兰阳性杆菌 有芽胞 芽胞杆菌属：炭疽芽胞杆菌 、蜡样芽胞杆菌 无芽胞 李斯特菌属：产单核细胞李斯特菌 丹毒丝菌属：红斑丹毒丝菌 加特纳菌属：阴道加特纳菌 棒状杆菌属：白喉棒状杆菌 诺卡菌属： 星形诺卡菌、巴西诺卡菌 分枝杆菌属：结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、 非结核分枝杆菌 芽胞杆菌属Bacillus 70多个种，大多数为腐生菌，有些菌种对人类有益，可作为益生菌应用。 人类主要致病菌种： 炭疽芽胞杆菌（B. anthracis）：动物和人类炭疽病 蜡样芽胞杆菌（B. cereus）：食物中毒 共同特点： 革兰阳性粗大杆菌 形成芽胞 专性需氧 广泛分布于自然界，大多数为腐生菌，极少数对人和动物有致病性。 炭疽芽胞杆菌B. anthracis 一、生物学特性 （一）形态染色 革兰阳性大杆菌，两端平齐 竹节状排列 无鞭毛 毒力株有荚膜 有芽胞 椭圆形，小于菌体，位于菌体中央 多在有氧条件下形成芽胞 在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞， 尸体严禁解剖 （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求不高 普通琼脂平板：灰白色、粗糙型菌落、卷发状（低倍镜下） 血平板：培养12～15h不溶血，24h后轻度溶血（重要鉴定特征，其他需氧芽胞杆菌大多溶血明显而快速） 肉汤培养基：絮状沉淀 （三）生化反应 分解葡萄糖、蔗糖、麦芽糖等 触酶+ 硝酸盐还原试验+ 卵磷脂酶弱阳性 （四）抵抗力 本菌芽胞的抵抗力极强 耐热、耐干燥，干燥环境中可存活数十年 对氧化剂敏感 二、致病物质与所致疾病 为需氧芽胞杆菌属中致病力最强的一种细菌。因芽胞的抵抗力强，常被利用作为生物武器。 1. 致病因子：荚膜 炭疽毒素 2. 所致疾病： 人、畜共患的急性传染病——炭疽病（乙类传染病） 接触——皮肤炭疽（最多见） 食用——肠炭疽 吸入——肺炭疽（少见，但病死率高，按甲类传染病处理） 三、微生物学检验 要求： 严格按烈性传染病检验守则操作。 快速检出、鉴定病原菌，早期确诊、查清疫源、及时治疗和采取预防对策。 （一）标本的采集 分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液 严禁宰杀和解剖死畜，注意个人防护 （二）检验方法 1. 涂片染色 革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞。 2. 分离培养 一般标本：接种血平板——卷发状菌落 污染标本：接种于含有戊烷脒多粘菌素B的选择性平板。 3. 鉴定 形态特点： G染色、荚膜、芽胞染色、动力－ 菌落特性：粗糙型菌落、卷发样、溶血特点 生化试验：触酶+、硝酸盐还原试验+ 特殊鉴定试验： 串珠试验 青霉素抑制试验 重碳酸盐生长毒力试验 噬菌体裂解试验 串珠试验： 待检菌 0.05～0.5 U/ml青霉素培养基 炭疽杆菌变成大而均匀的圆球体。（类炭疽－） 青霉素抑制试验： 5U/ml青霉素培养基 ： 生长 ≥10U/ml青霉素培养基： 不生长 重碳酸盐生长毒力试验： 将细菌接种于含0.5%NaHCO3的血平板 有毒株: 粘液型菌落，有荚膜，挑取时呈粘丝状（鉴别要点） 无毒株：粗糙型菌落，无荚膜 蜡样芽胞杆菌 B. Cereus 一、生物学特性 (一)形态染色 革兰阳性大杆菌，与炭疽芽胞杆菌相似 有芽胞：与炭疽芽胞杆菌相似 有周鞭毛（炭疽杆菌无） 无荚膜（炭疽杆菌有毒株形成荚膜） (二)培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求不高 普通琼脂平板：灰白色大菌落，毛玻璃状或蜡滴状，有蜡样光泽 血平板：β溶血（炭疽杆菌仅轻度溶血） 肉汤培养基：混浊生长，形成菌膜 二、临床意义 在自然界广泛分布，主要引起食物中毒，以夏、秋季多见： 腹泻型——不耐热肠毒素引起，以腹泻腹痛为主 呕吐型——耐热肠毒素引起，以恶心呕吐为主，腹泻少见 三、微生物学检验 （一）标本采集 可疑食物、患者粪便及呕吐物。 （二）直接显微镜检查 （三）分离培养 标本接种→血平板、普通琼脂平板 （四）鉴定 菌落特征、形态染色、生化试验、血清分型等。 李斯特菌属和丹毒丝菌属Listeria Erysipelothrix 李斯特菌属和丹毒丝菌属均为需氧无芽胞的革兰阳性杆菌 在自然界分布广泛 李斯特菌属有7个种，其中对人和动物致病的主要是产单核细胞李斯特菌（L. monocytogenes