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疑难血型鉴定中若干问题1
疑难血型鉴定中若干问题 输血前免疫学检测 输血前检测要求做ABO血型(正反联合)、RhD抗原鉴定,抗体筛选和交叉配血 。 血型定型是基础 。 目的:准确定型,选择相容血液。 意义:输血安全、有效。 红细胞血型系统简介 血型系统:29个血型系统,已检出的抗原超过200个。 血型集合:达不到血型系统命名标准的血型抗原,但在血清学、生化、或遗传学上有相关性。 血型系列:一个高频组(>90%),一个低频组(<1%)。 红细胞血型系统简介 最具临床意义:ABO、Rh 重要临床意义:输血安全、器官移植、新生儿溶血病。 ABO血型临床意义 溶血性输血反应 ABO抗体与相应抗原结合后,能够激活补体,导致红细胞在血管内立即被破坏。轻者仅表现为发热、腰背痛、血红蛋白尿或手术野弥漫性渗血。 重者可表现为DIC、休克、急性肾衰竭,甚至死亡。 ABO血型临床意义 新生儿溶血病 器官移植 ABO抗原的发育 在胚胎早期A和B抗原就开始产生,到出生时,他们比成人的抗原数目要少,大约是成人25~50%。 与抗A和抗B试剂血清反应比成人弱,18个月后才能充分表现出抗原性。 2~4岁时,抗原逐步发育成熟,并终生基本保持恒定。 ABO血型抗体 正常情况下存在于缺少相应抗原的人血清中。 新生儿ABO抗体很少;无抗体成人罕见。 自然产生抗体:IgM(主要是A和B型)、IgG类(主要是O型)。 IgM可被唾液中血型物质中和。 O型-抗A,B:识别A和B抗原表位共同的结构部分具有交叉反应性。 ABO血型系统的独特性质 血清中常存在反应很强的抗体,而红细胞上缺乏相应的抗原。 许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原(消化道呼吸道泌尿系统上皮细胞)以及分泌型人的分泌液(唾液、眼泪、尿液、消化液、胆汁、乳液、羊水、卵巢囊肿液、腹水)中存在着A、B、H血型物质。 ABO血型的鉴定 完整的ABO定型必须包括正定型和反定型两种方法,并互相核对其结果是否一致。 正定型 用已知型特异性的抗体试剂检查被检红细胞抗原。试剂血清常规用抗A、抗B两种标准血清。 反定型 用已知血型的红细胞检查血清中的抗体。试剂细胞常规用A、B和O型三种 红细胞。 血型鉴定方法 玻片法(瓷板法、纸片法) 试管法:经典的试管离心方法仍被认为是最可靠的ABO定型方法。 微量板法(U型或V型板):大量标本 微柱凝胶免疫实验技术(卡式) PCR方法 注意:细胞浓度、血清与细胞比例 ABO正反定型不符合原因 试验因素 假阴性:未加试剂;红细胞与血清比例不当;试验温度不当;离心速度不够;未判明结果为溶血;试验结果解读不准确。 假阳性:试剂血清、红细胞或生理盐水污染;应用不洁的器皿;离心过度;试验结果解读不准确。 患者本身 患者因素 红细胞(正定型): 红细胞抗原减弱:亚型、疾病 红细胞抗原增多:获得性B抗原 细菌污染造成多凝集现象 红细胞被自身抗体致敏 Wharton胶 混合外观凝集: 骨髓移植、近期输血 患者因素 血清方面的原因(反定型) 血清抗体减少:年龄因素 低丙种球蛋白血症 血清抗体增加:自身抗体的存在 同种抗体的存在 血清被细菌污染造成多凝集现象 球蛋白过高造成的缗钱状凝集 近期内血浆置换 溶血素 (溶血反应) 常见问题处理方法 初步检查:再取一份患者新鲜标本; 红细胞洗涤后配成2~5%浓度; 重复进行各项试验; 直接抗人球蛋白试验; 用O及自身细胞检测血清,怀疑抗I,用脐血细胞检查; 判定结果之前,实验管至少在室温和4℃放置30分钟,阴性者用显微镜观察结果。 进一步实验 增加试剂血清:抗A1 抗H 抗A,B 增加细胞:自身、O细胞、脐血细胞 唾液血型物质鉴定 吸收试验 放散试验 直接抗球蛋白试验 分子生物学实验 特殊ABO正反定型不一致的解决方法 异常正定型(红细胞问题) 抗原弱 获得性
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