第五章 protein的翻译PPT.ppt

Protein 翻译Protein translation; 从DNA转录到RNA可以利用碱基互补配对，但mRNA与的碱基序列与蛋白质的氨基酸序列却没有直接的对应关系，他们之间也没有直接的作用力，那么在这两种完全不同的遗传语言之间是如何沟通、如何传递信息的呢？ 信息的传递者就是tRNA，准确的来说，应该是氨酰基tRNA，它利用反密码子与mRNA配对，通过氨酰 tRNA 合成酶、利用副密码子来选择特异的氨基酸。;生命的中心法则;5.1 基本元件 ;5.1.1 tRNA;tRNA真实的空间构型;“L”结构域的功能;tRNA 的种类;副密码子与氨酰基tRNA的合成;Paracodon (副密码子) tRNA中决定负载特定氨基酸的空间密码，为同一种AARS 所识别的一组同功受体具有相同的副密码子 AARS 对paracodon 的识别与结合是通过氨基酸与碱基之间的连接实现的 副密码子将AARS分为两类 type I： Val,Arg,Gln,Glu,Ile,Leu,Met,Trp,Tyr，paracodon 大多位于反密码子臂 type II： paracodon 大多位于氨基酸接受臂，个别还同时在附加臂上有相应碱基 ;;;;两类酶与tRNA反应时－－接近模式不同;5.1.2 mRNA;原核生物mRNA的特征;Spacer 较长;其他特征 5’ 端有300个左右NT的leader（A/G－－－－AUG） AUG作为起始密码子（GUG、UUG） AUG前有 S – D 序列 S – D序列（Shine-Dalgarno sequence）： 位于AUG上游 4 ~13 个NT处的富含嘌呤的 3 ~9个NT的共同序列，其一致序列为 AGGAGG；与核糖体小亚基内16S rRNA 的 3’端富含嘧啶的序列3’------UCCUCC-----5’互补，使 tRNA正确定位于起始codon。 ;;Prok.mRNA转录、翻译和降解周期 ;真核生物mRNA的特征;5.1.3 核糖体及rRNA的结构;核糖体的结构;;核糖体的活性位点;两者之间形成一个mRNA通道 mRNA结合位点 位于30S 亚基的头部 S1可防止mRNA 链内碱基对的形成 S1 、S18、S21负责核糖体与mRNA、起始tRNA的结合，起始因子IF3也结合于此 16S rRNA 3’端是mRNA 与小亚基初始结合不可缺少的 P位点：肽酰－tRNA位点 大部分在小亚基内 ，小部分在大亚基内，16SrRNA的3’末端、涉及L2等蛋白 能够与起始 tRNA （fMet--tRNAf）相结合，且P位点会影响A位点的活性 A位点：氨酰基 tRNA 位点 主要在大亚基上 位点内mRNA 表面只对特定的 aa—tRNA表现出特异性，且A位点结合aa—tRNA 要求在P 位点上必须有肽酰tRNA存?? ;肽基转移酶活性位点 活性中心在大亚基上，位于P位点和A位点的连接处靠近 tRNA的接受臂 5s rRNA位点：与tRNA进入有关 EF—Tu位点：位于大亚基内，与氨酰基 tRNA的结合有关 EF—G 转位因子结合位点：大亚基靠近小亚基的界面处 E 位点 E1为脱酰基tRNA 离开核糖体提供出口 E2为多肽离开核糖体提供出口（占核糖体1／3） ;;5.2 遗传密码;5.1.1 密码子的破译;;5.1.2 密码子的简并现象;摇摆假说（Wobble hypothesis）;摇摆碱基的摇摆配对原则;摇摆碱基摇摆配对的机理;;5.1.3 tRNA丰度和密码子的使用频率;codon 的使用频率与 codon 与 anti-codon 间的作用强度有关 适中的作用强度有利于翻译的进行 弱配对作用形成的 aa—tRNAaa需要较长的时间进入A位点 强配对作用形成的 aa—tRNAaa需要较长的时间从核糖体的P位点卸载 ;;;5.1.3 线粒体密码的特殊性 ;;5.2 肽链的合成;5.2.1 起始tRNA与起始密码子的识别;;5.2.2 起始复合物与70S核糖体的形成;起始复合物的形成步骤;;5.2.2 真核生物蛋白质合成的起始;起始复合物的形成步骤;;5.2.2 肽链的延伸;延伸的过程;;;;;;5.3 多肽链合成的终止;肽链终止所需条件;终止机制;;5.4 蛋白质前体的加工与转运机制;5.4.1 前胰岛素原的加工;5.4.2 蛋白质的体内折叠;DnaJ协助DnaK的结合－－有利于新生肽的折叠；GrpE解离复合物而反复循环;5.4.3 蛋白质的转运机制;细菌中蛋白质的越膜;作用机制;;真核生物中蛋白质的越膜;越膜机制;;;