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第一讲电镜技术PPT
电镜技术与细胞超微结构基础;前 言;第一讲 电镜基本原理及在医 学中的应用;二、电镜基本工作原理; (一)分辨率、反差与形态研究的关系
光学显微镜的分辨率比较低,只能观察到大于0.25um的结构,主要受透镜的像差和光波的衍射影响,要观察细胞内和细胞间许多结构则无能为力。
什么是分辨率呢?
1、分辨率(Resolution)
又称分辩本领(Resolving power),是将邻近两点清晰区分、辩认的能力,用能被辨认的邻近两点的距离表示。
肉眼:在明视距离(25cm)时,为0.25mm;
;2、反差:
被观察物与其背景在亮度(黑白对比度)上有所不同,这种差别称为反差;透射电镜的反差主要由样品对电子的散射产生。
3、空放大
不能提供更为清晰的图像放大,称为无效放大。
4、不同分辨率的形态研究
;(二)、亚微结构与超微结构的概念及关系
亚显微结构(submicroscopic structure):
介于细胞水平和大分子水平之间的结构;简称为“亚微结构”或“亚细胞结构(subcellullar structure)”,也称“细微结构(fine structure)”
超微结构(ultrastructure):
严格的讲,是指分子水平的结构,目前一般书刊对亚显微结构和超微结构无严格的界限,往往将普通光镜分辩界限以下的结构笼统称为超微结构。;;
;(1)、透射式电子显微镜
I、TEM的基本结构
照明系统(真空系统)——样品室——
成像系统——观察记录系统
II、透射电镜的成像原理
III、透射电镜的用途;;;;;;;;(2)扫描电子显微镜
I、SEM的基本结构
照明系统(真空系统)——扫描系统
——检测器
II、SEM的成像原理
III、SEM的用途
;;;;;;(3)、分析电子显微镜
分析电子显微镜是透射电镜或扫描电镜与X射线显微分析仪相组合的一部信息综合分析仪。 X射线显微分析仪是通过测量X射线信号的能量和强度分布对样品进行化学成分分析的仪器。它具有分辨率高、使用方便、分析结果准确等特点。
I、波谱仪(wavelength-dispersive
spectrometer , WDS)
II、能谱仪(energy-dispersive
spectrometer ,EDS) ;三、电镜在医学中???应用;础理论研究又扩展到了临床医学的实际应用方面, 如疾病的病情判断、病因鉴定、对肿瘤、血液病及肾脏疾病的诊断和分型等。
1、电镜在医学上作用和局限性
电子显微镜问世以后才有条件对小于细胞的结构进行研究,其中包括生物大分子、病毒、原核细胞和真核细胞及细胞器。
(1)、科研:
I、正确认识电镜的作用
电镜是一种先进的科学仪器,其主要特点是分辨率高,能观察细微结构。但正是由于其高放大,使得观察范围较小,且制样复杂。而光镜则有制样简单,观察面大,能动态观察活细胞等优点。因此电镜不能取代光镜,二者应配合使用,取长补短. ; 电镜是一种先进的科学仪器,其主要特点是分辨率高,能观察细微结构。但正是由于其高放大,使得观察范围较小,且制样复杂。而光镜则有制样简单,观察面大,能动态观察活细胞等优点。因此电镜不能取代光镜,二者应配合使用,取长补短。
在科学研究中,电镜所起作用具体表现为:
a、探查作用:观察很早期的改变,功能活动的提示,因复杂的代谢过程中的定位往往是光镜看不见的;病毒学、病因学、免疫损伤等病因的探讨;
b、依据作用:“眼见为实”的重要性,在机理研究中从形态学上证实了许多理论假说;
C、辅助作用:电镜结果注意与光镜的关系,与宏观的关系,因其本身有较大的局限性,如取材小,观察范围亦小,特别是在病理诊断上应与其他方法结合进行研究。;
III、采用适当的电镜制样方法
(2)、临床诊断
I、正确认识电镜的高放大性能与电镜取材的局限性的关系
II、强调取材部位的准确性
III、要有丰富的超微组织学和病理学知识
IIII、结合光镜结果及细胞化学结果做出诊断;;(2)、学习方法(图像识别)
I、明确照片是由那一类电镜拍摄
II、什么制样方法
III、放大倍数大概是好多
IIII、大概确定组织或细胞类型
IIIII、组织或细胞是否正常,有何异常;;四、细胞超微结构研究的展望;本课程的重点内
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