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石斛多糖提取工艺研究 　　[摘要] 目的:对石斛多糖提取工艺进行优化。方法:比较不同浸提温度、时间和除蛋白方法对多糖得率的影响,优化工艺。结果:石斛多糖最佳提取工艺条件为90℃水浸提3～4 h,料水体积比为1∶50,采用Sevag法脱蛋白,样品-Sevag溶液=1∶1、氯仿-正丁醇=10∶2.5,提取时间为30 min。结论:此方法提取石斛多糖得率高,为理想的提取条件。 　　[关键词] 石斛;多糖;提取工艺 　　[中图分类号] R284.2[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2010)04(c)-040-03 　　 　　Extraction technology of polysaccharide in Dendrobium 　　CHEN Rui 　　(Medical Promotion Profession, Guangzhou Vocational College of Science and Technology, Guangzhou510550, China) 　　[Abstract] Objective: To study optimum extracted-conditions of polysaccharide in Denderobiun. Methods: The most yield of polysaccharide was gotten which volume ratio of dendrobium to water, distilling temperaturethe and method of isolating protein were used. Results: The effects was best when volume ratio of dendrobium to water was 1∶50, distilling at 90 ℃ for 3-4 hours, isolating protein by seveg method in the mixture composed of 50% sample and 50% sevag solution, the ratio of chloroform and n-butano was 10∶2.5, the extraction technology was 30 min. Conclusion: The extraction method is perfect because the most yield of polysacchareide is gotten. 　　[Key words] Dendrobium; Polysaccharide; Extraction technology 　　 　　石斛属植物具有很高的药用价值。而多糖类成分是石斛中具有免疫增强作用[1]和抗肿瘤作用[2]的活性成分,常以多糖的含量高低来判断石斛药材质量的高低。本研究对石斛多糖的提取工艺进行优化探讨,为其工业化生产和利用提供理论基础。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　仪器设备有ESJ120-4型万分之一天平,电热恒温水浴锅,RE-52A型旋转蒸发器,755B型紫外可见分光光度计。 　　1.2 试药 　　石斛(四川乐山市歇马乡,经成都中医药大学严铸云教授鉴定为细茎石斛)洗净杀青后于60℃烘干,粉碎,过50目筛备用。本实验所用试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 提取工艺[3-5] 　　取石斛粗粉约50 g,加入石油醚(60～90℃)250 ml,回流提取1 h,脱脂,过滤,挥干溶剂,加入80%乙醇250 ml,回流提取1 h,过滤,挥干溶剂,加入蒸馏水浸提2次,趁热过滤,减压浓缩至150 ml,0.1%活性炭脱色,过滤,脱蛋白,加入95%乙醇使溶液含醇为80%,于冰箱中静置过夜,沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚依次洗涤,烘干,得石斛多糖粗制品。 　　2.2 加水量的选择 　　原料与水体积比分别为1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60,比较其多糖得率。 　　2.3 浸提温度的选择 　　分别在80、85、90、100℃条件下浸提3～4 h,比较其多糖得率。 　　2.4 蛋白去除方法的选择 　　本实验运用Sevag法、TCA法[5-6]去除石斛多糖中的蛋白质。 　　2.4.1 Sevag法多糖提取液,真空抽滤,浓缩至一定体积,按比例加入氯仿-正丁醇混合液,剧烈振荡,以5 000 r/min的转速离心15 min,取上清液。如此反复操作3次。为取得最佳的实验效果,对提取条件设计了正交试验[7],因素水平见表1。 　　 　　表 1 Sevag法脱蛋白正交设计