野生型及c.454ct突变型人vegfa基因重组真核表达载体的体外构建及表达研究-construction and expression of recombinant eukaryotic expression vectors of wild type and c 454 ct mutant human vegfa gene in vitro.docxVIP

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野生型及c.454ct突变型人vegfa基因重组真核表达载体的体外构建及表达研究-construction and expression of recombinant eukaryotic expression vectors of wild type and c 454 ct mutant human vegfa gene in vitro

学位论文原创性申明本人慎重声明:本人所呈交的学问论文是本人在导师指导下独立进行实验研究工作所取得的成果,本论文中不包含其他人已经发表或已经获得的研究成果。在本论文撰写中所引用其他研究者的研究内容和成果时已在论文中给予特别标注和明确说明。对本论文的实验研究以及论文撰写过程中给予帮助和建议等贡献的其他人士,也已经作了致谢说明。本人完全理解本声明的法律责任,以及所涉及的结果将由本人担任。学位论文作者签名:日期:年月日——————————————————————-----------------------关于学位论文著作权的共享声明根据《中华人民共和国著作权法》和《高等院校知识产权管理条例》,本学位论文,题目:野生型及c.454CT突变型人VEEEEGGGGFFFFAAAA基因重组真核表达载体的体外构建及表达研究,是研究生在导师指导下完成的职务作品,得到蚌埠医学院相关部门科室的物质技术和经费支持,因此。本学位论文的著作权由研究生、导师和蚌埠医学院三方共同享有,均享有署名权和使用权等权益;本学位论文成果归属蚌埠医学院。根据国家授予条例,学校对本学位论文有使用权,包括保存本学位论文;因教学和科研的目的,保留在图书馆被查阅或借阅;学校可根据国家规定将本学位论文送交国家有关部门保留和使用。学校在公布本学位论文的全部或部分内容时,应保障研究生和导师的署名权等权益。研究生和导师在公开发表本学位论文的全部或部分内容时必须保障学校的署名权等权益,即在发表论文时蚌埠医学院及相关部门科室应署名为作者单位。声明人完全理解本人声明的法律责任。研究生签名:导师签名:日期:年月日目录中文摘要...........................................................................................................................1英文摘要...........................................................................................................................3论文正文引言............................................................................................................................6第一部分野生型VEGFA基因重组真核表达载体的构建与鉴定8第二部分c.454CT突变型人VEGFA基因重组真核表达载体的构建与鉴定...21第三部分野生型及c.454CT突变型人VEGFA基因真核细胞表达的研究32讨论........................................................................................................................51结论.........................................................................................................................56参考文献.........................................................................................................................57致谢...........................................................................................................................60附录附录A英中文术语和缩略语对照表61附录B常用试剂的配制62附录C攻读学位期间发表的文章64附录D综述65野生型及c.454CT突变型人VEGFA基因重组真核表达载体的体外构建及表达研究中文摘要背景:我们前期研究首次报道血管内皮生长因子A(VEGFA)基因c.454CT无义突变与先天性左室流出道梗阻(LVOTO)发生有关。然而c.454CT突变体的功能尚需进一步研究。目的:构建人野生型和突变型(c.454CT)VEGFA基因重组真核表达载体,分别检测其在人胚胎肾细胞(HEK293T)中的转录和表达,进一步探讨VEGFA基因c.454CT突变体在LVOTO中的发病机制。方法:(1)采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人脐血

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