葡萄籽多酚大孔树脂纯化过程近红外光谱快速检测.docVIP

葡萄籽多酚大孔树脂纯化过程近红外光谱快速检测 　　?摘 要 采用近红外光谱透射法, 对葡萄籽提取液大孔树脂层析过程多酚含量进行快速无损测定。以Folin?Ciocalteus比色法为对照方法, 运用偏最小二乘法（PLS）建立定量校正模型, 测定大孔树脂洗脱过程葡萄籽多酚浓度变化。该模型相关系数R?2达到0.9995, 校正集误差均方根（RMSEC）和预测集误差均方根（RMSEP）分别为0.713和2.67, 校正集相对偏差（RSEC）和预测集相对偏差（RSEP）分别为2.39%和8.48%。本方法快速、有效、无损, 可用于葡萄籽多酚柱层析纯化过程检测和质量控制。 　　关键词 近红外透射光谱; 葡萄籽; 多酚; 大孔树脂? 　　 　　 　　1 引 言 　　? 　　磷是生物能量传输和动植物、浮游生物生长必需的营养要素, 水体中的氮和磷的浓度及其比值显著影响浮游植物的丰度及种类。磷的生物可利用性可能直接影响到全球海洋初级生产力水平??\?。因此, 磷酸盐含量是生物地球化学过程的关键参数, 而活性磷酸盐是研究磷在水体中循环的最关键参数。? 　　目前, 实验室的活性磷酸盐检测方法主要有磷钼黄分光光度法、磷钼蓝（Phosphomolybdenum blue, PMB）分光光度法及流动注射分光光度法等??\?。由于在磷酸盐长期在线监测过程中, 有色络合物会累积附着在透光窗口上, 导致测量得到的透射光强度减弱, 从而使检测结果偏离标定曲线, 产生检测误差。克服有色络合物附着污染的有效方法是对仪器进行定期标定。但长期在线标定存在以下的问题：（1）现场环境一般难以在线标定, 并且标准溶液也难以在线长期保存；（2）标定只能保障特定时刻数据检测的准确性, 而无法保障介于两次标定之间的检测数据的准确性。已有研究者基于改进试剂的保存状态和条件, 解决了传统分光光度法所需的试剂保存有效期较短的问题??\?, 但是并没有解决络合物附着污染带来的干扰问题。有研究者提出在数据处理中对监测数据进行线性补偿的方式, 去除在长期监测中因有色络合物污染透光窗口导致光强减弱的干扰??\?。但是这种方法只对特定场所的匀速渐变附着有效, 而现场络合物附着往往是阶段性突变过程, 所以该补偿方法不具有通用性。再者, 络合物在透光窗口沉积与磷酸盐样品??度及检测频率有关。因此, 该线性补偿的方法并不能实质解决干扰问题。? 　　针对活性磷酸盐长期原位监测问题的瓶颈, 本研究提出一种新的方法――脉动变光程检测, 即将分光光度检测的光程分为多等分的脉动量, 当检测光程变化一个或多个脉动量时, 检测装置动态记录测量的吸光量。该原理引入一个稳定的检测光程变化量ΔL, 而测量的吸光量的变化量仅与ΔL、待测物浓度与吸光常数相关。因此, 其它干扰因素, 如光源漂移、有色络合物附着等, 则可视为不变量被除去。2 检测原理? 　　 　　如果在较短时间内, 改变检测光通过待测物的吸光光程（L）, 也就是恒压改变检测容腔的容积, 而保持待测物温度、压力、浓度（c）等不变, 由于络合物附着扰动是一个相对长期缓慢变化过程, 因此在前后相邻的检测过程中可视为不变量。则脉动变光程后待测物的光程变化了ΔL。根据朗伯?比尔定律, 上述过程可表示为：? 　　 　　3 实验部分? 　　3.1 仪器与试剂? 　　CHEM4?VIS?FIBER分光光度计（Ocean optics）；脉动变光程分光光度系统（自制, 图1）。CHEM4?VIS?FIBER分光光度计覆盖430～990 nm的光谱范围, 光学分辨率为1.0 nm, 通过RS232串行接口可将光强数据发送给数据接收端。CHEM4?VIS?FIBER通过准直镜和光纤, 可以实现将其光源和探测器应用于脉动变光程分光光度系统。? 　　6.0 mol/L H?2SO?4（分析纯）；钼酸铵溶液：溶解28 g钼酸铵（分析纯）于200 mL水中；酒石酸锑钾溶液：溶解6 g酒石酸锑钾（分析纯）于200 mL水中, 贮于聚乙烯瓶中；混合溶液：边搅拌边将45 mL钼酸铵溶液加到200 mL 6.0 mol/L H?2SO?4中, 加入5 mL酒石酸锑钾溶液, 混匀, 贮于棕色玻璃瓶中；抗坏血酸溶液：溶解20 g抗坏血酸（分析纯）于200 mL水中, 盛于棕色聚乙烯瓶中；磷酸盐标准贮备溶液（?0.300 g/L P?）：称取1.318 g6.0 mol/L KH?2PO?4（优级纯）溶于10 mL 6.0 mol/L H?2SO?4及少量水中, 全量转入1000 mL量瓶, 定容, 混匀, 再加1 mL三氯甲烷（分析纯）；磷酸盐标准使用溶液（3.00 mg/L P）：量取?1.00 mL磷酸盐标准贮备溶液至100 mL量瓶中?, 定容, 混匀, 加两滴三