igfⅰ opn pten在非小细胞肺癌中表达及其意义-expression and significance of igf ⅰ opn pten in non-small cell lung cancer.docx

论文独创性说明本人申明所呈交的学位论文是在我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解学校关于保留、使用学位论文的各项规定，（选择“同意/不同意”）以下事项：1.学校有权保留本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文；2.学校有权将本人的学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》或其他同类数据库，传播本学位论文的全部或部分内容。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：前言肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，半个世纪以来肺癌的发生率和死亡率一直呈明显上升趋势。据统计在多数发达国家居恶性肿瘤首位，在我国多数大城市肺癌的发病率和死亡率也居恶性肿瘤的第一位或第二位。90%以上患者发病年龄超过四十岁。近年由于女性吸烟者不断增多，肺癌发病的男女之比已由4：1上升到1.5：1。肺癌中75%-80%是非小细胞癌，非小细胞癌主要包括鳞状细胞癌和腺癌，肺癌的病因复杂，目前认为主要与吸烟、空气污染、职业因素有关，各种致癌因素主要是作用于基因，引起基因改变而导致正常细胞癌变。胰岛素样生长因子Ⅰ（insulin-likegrowthfactorⅠIGF-Ⅰ）是胰岛素样生长因子家族中的一员，又名生长介素，主要由肝脏产生，其基因定位于人类12号染色体q22-24，是由70个氨基酸组成的单链多肽[1]。IGF-Ⅰ是一种多功能细胞调控因子，其结构与胰岛素相似，其与特异的靶细胞表面受体结合发挥功能。IGF-Ⅰ受体（IGF-ⅠR）是一个四聚体，包括一对α亚基和一对β亚基，α亚基上有IGF-Ⅰ结合位点，位于细胞外；β亚基横跨细胞膜，具有酪氨酸激酶活性，起着信息传递的作用。IGF-Ⅰ与α亚基结合后，激活β亚基上的酪氨酸激酶，使之磷酸化，引起胞浆内一系列的信号途径发生和基因转录表达，从而产生IGF-Ⅰ的生物学效应[2]，现在的研究表明IGF-Ⅰ在肿瘤的发生发展、浸润及远处转移过程中发挥重要作用，目前认为主要是通过保护肿瘤细胞逃避凋亡、促进肿瘤细胞形成与增殖、调节癌基因与抑癌基因的表达来发挥以上作用的。IGF-Ⅰ主要是通过PI3K/AKt和MAPK途径对细胞凋亡进行调控，在PI3K/AKt途径中，IGF-Ⅰ与其受体结合后PIP3激活细胞内3磷脂酰肌醇激酶（PI3K）而活化PIP3，活化的PIP3与丝-苏氨酸激酶（serine-threo-ninekinase,AKt）或蛋白激酶B(ProteinKinaseB,PKB)结合,激活PKB，后者能进一步激活G1细胞周期蛋白依赖性激酶，正性调节细胞周期进程，从而促进细胞增生。在MAPK途经中,IGF-Ⅰ与受体结合后活化Ras蛋白,活化的Ras激活Raf的蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶，使MAPK磷酸化,活化的MAPK激活下游效应分子,这些因子促进细胞周期基因的转录，抑制细胞凋亡途径。肿瘤的浸润转移是一个多步骤复杂的过程，在这个过程中整合素发挥着重要的作用[3]。整合素是一种膜镶嵌蛋白，由18α和8β两个亚单位非共价形成异二聚体复合物，亚单位的变异使整合素对肿瘤发挥不同的作用，可以介导细胞和细胞外基质的黏附，促进肿瘤细胞的浸润和转移。整合素调控着细胞向细胞外基质的黏附、转移、分化和对凋亡的抑制作用，IGF-Ⅰ在这些过程中也发挥着相似的作用[4]。IGF-ⅠR在肿瘤转移的过程中扮演着重要的调节作用，IGF-ⅠR主要是通过上调VEGF（血管内皮细胞生长因子）的表达来实现其促进血管生成的，诱导血管和淋巴管的形成，相关研究表明VEGF的高表达与肿瘤的转移浸润及患者的预后不良有关[5]。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是一种具有分泌性、黏附性、钙结合糖磷酸化蛋白，含有特异的与细胞黏附有关的RGD（Arg-Gly-Asp）序列，基因定位于人类4号染色体q13，在1979年由Senger等[6]报道，是骨骼和牙齿矿化细胞外基质的主要组成成分。OPN的受体家族包括整合素受体和CD44受体，整合素受体包括ανβ3、ανβ5、α9β1、α4β1，不同的受体介导产生不同的OPN功能，OPN与整合素受体结合后引起聚集黏附激酶（FAK）磷酸化，激活Ras、MAPK途径，调节细胞骨架蛋白组装、细胞迁移。在这些整合素受体中主要是和ανβ3结合，然后通过PI3K/Akt/IKK(κB激酶抑制物)信号途径激活NF-κB（核因子κB），上调尿激酶型纤溶酶激活物（uPA）分泌，促进肿瘤浸润、转移，在