hpv16 e6变异在天津市筛查人群和宫颈病变患者中的研究-study on hpv 16e6 mutation in screening population and cervical lesion patients in tianjin.docx

学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。必威体育官网网址，在年解密后适用本授权书。本论文属于不必威体育官网网址 ??。（请在相对应的方框内打“√” ）学位论文作者签名：日期：年月日 导师签名 ：日期：年月日目的：中文摘要调查人乳头瘤病毒（Human papillomavirus , HPV）16 E6 基因变异在天津市 HPV 感染健康筛查人群中的分布特征，分析健康筛查妇女中 HPV16 变异情况， 并研究宫颈病变患者中 HPV16 E6 变异型别与宫颈癌及其癌前病变的相关性，了 解天津市人群中导致宫颈癌的高危变异型别，从而为 HPV16 高致癌能力因素的 研究提供理论依据，为天津地区 HPV 治疗性疫苗的研发积累流行病学数据。 方法：于 2013 年 4 月至 10 月采用普查的方法对 2000 例天津市市区智力健全、有 性生活的女性开展宫颈癌 HPV 感染筛查。所有研究对象均签署知情同意书并进 行流行病学问卷调查，同时收集调查人群宫颈脱落细胞。并于 2013 年 10 月至2014 年 4 月在天津市中心妇产科医院阴道镜门诊对 212 例首次阴道镜检查可疑 宫颈病变患者于宫颈活体组织检查前采集宫颈脱落细胞，收集的宫颈脱落细胞 用于 DNA 的提取。提取的 DNA 采用巢式 PCR 或 MGP PCR 检测 HPV 感染情 况，对 HPV 阳性的 PCR 产物用焦磷酸测序（Pyrosequencing）技术进行 20 种 HPV 分型。对于 HPV16 阳性的标本通过特定 PCR 和焦磷酸测序技术对 E6 基因 的 7 个位点的变异进一步检测。应用 SPSS17.0 软件对资料进行 χ2 检验及危险相 关性的分析。结果：1. 2000 例宫颈癌筛查人群中 HPV 阳性者共有 271 例(13.6%)，其中最常见 的型别为 HPV16，占 107 例（39.5%）。2. 2000 例宫颈癌筛查人群中 107 例 HPV16 型阳性标本共检出 87 例 HPV16 E6 基因阳性标本，其中欧洲标准原型（European prototype，E-p）变异是最普遍 的，占 72 例（67.3%），亚洲型（Asian，As）变异次之，占 10 例（28.0%）。其 余变异为 E-G350、E-C109 和亚美型（Asian-American ，AA），分别占 3 例、1 例和 1 例。3. 2000 例宫颈癌筛查人群中，不同年龄组 HPV16 E6 变异率不同，其中以≤30 岁年龄组 HPV16 变异频率最高，最常见的变异为 E-p。然而 HPV16 E6 变异 频率在不同年龄组之间无统计学意义（P﹥0.05）。4. 天津地区宫颈病变妇女中 HPV16 DNA 检出率在 91 例炎症及 CINI 级，I90 例 CINII-III 级和 31 例浸润性宫颈癌组织中分别为 18.6%（11/59）、51.7%（45/87）、83.9%（26/31），随着宫颈病变程度的增加 HPV16 感染率增加。5.天津地区 212 例宫颈病变标本中 82 例 HPV16 E6 基因测序全部成功， 共检测出 2 个突变位点，最常见的 HPV16 变异株为 As 型，约占 54.9%（45/82）, 其次为 E 型，约占 45.1%（37/82），其中 E-p 变异株占 83.8%（31/37），E-G350 变异株占 16.2%（6/37）。As 变异和 E 变异相比与宫颈病变的严重程度密切相关（OR :4.337；95% CI: 1.248-15.067；P=0.015）。6.E-G350 变异株在 CINII-III 级和浸润性宫颈癌标本中分别占 9.3%（4/43）、8.3%（2/24），而炎症及低级别病变组中并未检测到，各病变组之间无统计学差 异（P﹥0.05）。7. As 变异在年轻组（≤35 岁）和中老年组（35 岁）中突变率分别为 75.9%（22/29）、50.0%(19/38)，As 变异发生率在两组间具有统计学意义（P=0.031）。 结论：1.HPV16 是天津地区宫颈癌筛查妇女及宫颈病变患者中最常见的型别，是高 级