cyclophilin a结合caveolin1降低大鼠血管平滑肌细胞胆固醇蓄积word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目 录 一 . 主 要 英 文 缩 略 语 索 引 … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 二 . 中文摘要 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2 三 . 英文摘要 ……………………… ………………… …………………4 四. 论文正文 （ 1 ）前言 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 6 （ 2 ）实验材料 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 8 （ 3 ）实验方法 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 0 （ 4 ）实验结果 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 1 4 （ 5 ）讨论 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2 8 （ 6 ）结论 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 31 五 . 参考文献 …………………… ………………… ………………… 32 六. 综述…………………………………………………………………3 6 七. 已发表文章 …………………………………………………………4 2 八. 致谢…………………………………………………………………4 3  PAGE 44 主要英文缩略语索引 AsAtherosclerosis动脉粥样硬化 CPA Cyclophilin A亲免素蛋白A CAV-1 Caveolin-1小凹蛋白-1 DMEM Dulbecco’s Modified Eagle MediμM培养基 DMSO Dimethyl Sulphoxide二甲基亚砜 FC Free cholesterol游离胆固醇 TC Total cholesterol总胆固醇 HPLC High performance liquid chromatography高效液相色谱 CSA Cyclosporin A环孢霉素A PBS Phosphate-buffered saline磷酸盐缓冲液 SDS SodiμM dodicyl sulfate十二烷基磺酸钠 VSMCs Vascular smooth muscle cells血管平滑肌细胞 WB Western blot蛋白质免疫印迹 IPCo-immunoprecipitation免疫共沉淀IFImmunonuorescence间接免疫荧光法 Cyclophilin A 结合 Caveolin-1 抑制大鼠血管平 滑肌细胞胆固醇蓄积 研 究 生：郭琰 指导教师：廖端芳 教授 庹勤慧 副教授 摘 要 目的：通过 Ox-LDL 诱导的血管平滑肌细胞荷脂模型，观察胆固醇转运复合物中关键 蛋白 cyclophilin A 和 caveolin-1 在细胞荷脂过程中的表达变化及其与细胞内胆固醇蓄积 的关系，进而分析这两种蛋白在血管平滑肌源性荷脂细胞形成过程中的作用。 方法：实验采用75mg/L Ox-LDL 与血管平滑肌细胞共同孵育不同的时间(0，24，48， 72h)，建立平滑肌细胞荷脂模型；Western-blot、免疫荧光法分别定量，定位检测cyclophihn A和caveolin-1蛋白的表达改变；油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况；高效液相色谱 法检测细胞内外胆固醇含量变化，免疫共沉淀检测cyclophilin A和caveolin-1相互作用。 结果：75mg/L Ox-LDL 与血管平滑肌细胞共同孵育24，48，72小时后，与未处理组比 较，cyclophilin A的蛋白表达逐渐减弱，同时，胆固醇转运复合物中另一关键蛋白 caveolin-1的表达也逐渐降低，差异均有显著性（P0.05）。间接免疫荧光定位检测发现 Ox-LDL 显著抑制平滑肌细胞中cyclophilin A与caveolin-1在胞膜、胞浆中的表达，且随 着处理时间的延长，作用更明显。油红O染色显示在Ox-LDL 处理细胞48小时后，细胞 内有大量脂滴的形成，高效液相检测分析细胞内总胆固醇含量不断增加，细胞外胆固醇 总含量随着Ox-LDL 处理24、48、72小时依次下降。并且cyclosporin A抑制cyclophilin A 活性后能增加细胞内总胆固醇量和降低细胞外胆固醇总量。免疫共沉淀结果显示 cyclophilin A和caveolin-1在大鼠血管平