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组培接种工培训教程科研中心组培车间目录基本概念规章制度接种技术安全生产基本概念组织培养：根据植物细胞全能性，利用植物的一部分组织，在人工培养的条件下，使之不断的快速分化繁殖，最终形成与母本植株相同性状的大量种苗，简称组培。培养基：为培养物提供营养物质，并起到固定作用的介质。基本概念污染：因受外界因素感染，培养基表面或内部长出细菌或真菌的现象。真菌：白色、黄色或黑色等毛状霉菌，分布在培养基表面或瓶壁，接种后4~8天形成可见菌落，主要传播途径:空气传播。（一般操作不规范容易引起，如手经过切割盘、经过消毒好的瓶口上方、口罩没戴好等等。）细菌：白色、黄色或红色丝状、片状菌落，表面光滑湿润，边界清晰，分布在培养基表面、内部，植株基部切口处。接种后3~5天形成。主要转播途径：接触传播。（一般是工具没消毒好或工具碰到其它物体还在继续使用等引起）。基本概念有菌：已经污染的材料或培养基（瓶内任何部位一旦带菌均视为污染）工作台四壁、工作台面、瓶子、接种灭菌器、培养瓶外壁、未消毒的接种工具、操作人员的体表、呼吸出的气体、说话时溅出的唾液。无菌：消毒后未污染培养瓶内部，未污染的母体材料瓶内部，消毒后的纸包内部（切割盘等），消毒后的镊子和刀片前端，工作台内部的空气。污染的形成：有菌和无菌的直接或间接接触，无菌部位的风向上方有有菌物体存在或经过。基本概念（容易污染的环节）无菌操作：在特定的无菌设备下，遵守严格的技术规范进行的操作方式。接种：在组培过程中，在无菌条件下，把芽丛从母瓶中取出，切分整理后，再接入新的培养基当中。规章制度净区工作人员工作守则1.禁止在培养室、接种室内讲话、串岗。2.禁止将脏物品（包括衣服）、食物带进培养室、接种室。3.患感冒时不准入室操作。4.室内操作时动作要轻、缓，不允许打闹和大声说话。5.进更衣室前先脱鞋、换衣服后用肥皂洗手、过风淋室、穿拖鞋、穿白大褂戴帽子（把所有头发全戴进）、戴口罩、进出门必须随手关门。工作人员要勤洗澡、勤换衣服、勤剪指甲。禁止在接种室内听MP3、接电话、发短信。规章制度工作台使用操作守则1.使用超净工作台前，必须确认有关插座、插头、电源线和开关无明显故障。2.工作台运行过程中，如发现有异常声音、气味出现，应立即切断电源。3.在下班时，必须超净关闭工作台的所有开关。4.酒精纱布、装有酒精的瓶子必须远离消毒器。5.接种工具在消毒完成后要及时拿出，避免过热烫伤。（一般消毒器温度达到270度以上开始计时，消毒一分钟以上为完成消毒）。操作技术—小瓶无菌操作技术规范1.准备工作程序操作人员换上拖鞋，通过工作人员通道，进入准备室。在准备室内，先换去外套，再用肥皂洗手或酒精消毒，通过风淋室风淋后，进入更衣室。在更衣室内，穿上工作服，戴好帽子、口罩。用痱子粉擦拭双手后戴上手套，进入接种室，打开工作台风机，打开消毒器。操作技术—小瓶无菌操作技术规范2、酒精消毒工作台及工具 .使用消毒酒精浸泡的消毒毛巾擦拭，程序为：工作台顶上一面→前方送风正处一面→右侧玻璃→台面右边→台面左边，消毒器→刀架、刀、镊子→喷壶→把工具摆在适当的位置。（所有消毒酒精为75%的酒精)操作技术----小瓶无菌操作技术规范 3.用接种灭菌器消毒刀架、刀、镊子。 4.将培养基和材料用消毒酒精浸泡的纱布擦拭后摆放到工作台面左侧。操作技术----小瓶无菌操作技术规范 5.从包装纸内取出无菌切割盘（注意手势），拿起母瓶打开盖子时，左手拿瓶盖，右手拿瓶身，打开后瓶盖不离手，并将瓶身放入左手心中、再从母瓶中取出苗放在切割盘上切分，切分完成后，先把苗接入相应的培养基中放好，接完后再用消毒毛巾把刀子和镊子擦干净插入消毒器中消毒以备后用。操作技术----小瓶无菌操作技术规范 6.下一瓶材料转接程序 用酒精纱布擦放适当数量的培养基和母瓶→把先前消毒好的刀和镊子放到刀架上，消毒器消毒时至少1分钟，然后放置于刀架上冷却待用，重复操作5。操作技术----小瓶无菌操作技术规范 7.收拾台面：把切割盘上的废材料倒入废料桶内，把空的培养瓶、使用过的切割盘拿出工作台，并用消毒毛巾把台面擦干净。操作技术----小瓶无菌操作技术规范 8.母瓶接完后或下午下班前，要写好标签贴在接好的瓶子上，标签的书写包括四个内容：品种名称、接种日期、培养基编号、接种员编号；品种为原材料的品种，培养基编号为相应编号，每种培养基都有编号；另外将接好的苗和未用完的原苗、培养基等分别放到指定的位置。 例如：在1月5日A1接构树a品种，同时接的继代和生根，没到下班 时间就下班了，B2要将接好的该品种贴上标签放到指定的位置；标签 的书写分别为： A1 3.12 a A2 3.12 a 生 技术规范----小瓶无菌操作技术规范 9.注意事项 9.1 台面上瓶数不可过多，打开瓶盖的瓶