大豆皮中过氧化物酶的提取.doc

目 录 摘要 1 关键词 2 Abstract 2 Key words 3 前言 3 1　材料与方法 4 1.1 试验材料 4 1.1.1　主要仪器及耗材 4 1.1.2　主要试剂 4 1.1.3　原材料 5 1.2 实验内容 5 1.2.1　过氧化物酶的提取工艺流程 5 1.2.2 酶活测定 5 1.2.3 放置时间对酶活影响 6 1.2.4 单因素试验 6 1.2.5 正交试验 7 2　结果与分析 7 2.1　酶活测定 7 2.2　放置时间对酶活影响 9 2.3 单因素试验 9 2.3.1液料比对酶活的影响 9 2.3.2提取时间对酶活的影响 10 2.3.3提取液浓度对酶活的影响 10 2.3.4提取温度对酶活的影响 11 2.3.5提取次数对酶活的影响 12 3　讨论 14 3.1 关于酶活测定方法的思考 14 3.2 关于酶液稀释方法的思考 14 3.3 关于单因素试验及正交试验优化的思考 14 3.4 实验操作注意事项 15 3.5 本实验的存在的问题及改进 15 参考文献 15 致 谢 16 大豆皮中过氧化物酶的提取 摘要 过氧化物酶[Peroxidase, POD，ECl.11.1.7(x)]是一类以血红素为辅基的酶，在生物中广泛存在，具有多种不同的生物功能，主要催化H2O2和有机过氧化物对多种有机物和无机物的氧化作用。它在蛋白质、多肽、激素、病毒、寄生虫、 生物降解及神经系统等方面都有应用，具有特异性强，灵敏度高等优点。本课题以大豆皮为原料，对大豆皮中提取过氧化物酶的工艺进行研究。通过单因素试验考察不同液料比、提取时间、提取温度、提取次数、提取液体积等对酶活的影响，并选取单因素试验中影响最明显的3个因素进行正交试验。结果显示，液料比、提取时间、提取温度这三个因素对提取效果明显。然后对此三因素进行正交试验结果显示：液料比 20ml/g，提取时间 5h，提取温度 40℃下，提取效果很好。虽然正交验证试验不是最好的一组，但考虑到误差存在，可视为最适组合。 关键词 大豆皮，过氧化物酶，提取 Extraction of peroxidase in soybean hulls Abstract Peroxidase [POD，ECl.11.1.7(x)]is a kind of redox enzyme Ⅵ with hemoglobin as prostheric group，which widely exists in organism and has many different biological fimctions．It mainly catalyzes the oxidation of hydrogen peroxide and organic peroxide with many inorganic and organic substances．For the high specificity and sensitivity，it is widely applied in protein，polypepfide，hormone，virus，parasite, lignification，biology degradation andneuro-system etc．The soybean hulls as raw materials, to study the extraction process of peroxidase in soybean skin．Effects of different ratio of liquid to material, extraction time, extraction temperature, extraction times, extraction volume effects on enzyme activity through the single factor experiment, and select the 3 most significant factors in the orthogonal test of single factor test．The results show, solid-liquid ratio, extraction time, extraction of these three factors on the extraction effect of temperature obviously．Then the three factors of the orthogonal experiment results showed: liquid ratio 20ml/g, extraction time 5h, ex