复旦大学期末复习【2】组织胚胎学自学课件（蓝本是老的红皮书）.pdf

绪论 ——组织学与胚胎学的研究方法 目录 一般光学显微镜技术 石蜡切片术  制作过程 3  取材和固定（1cm ）  脱水和石蜡包埋  切片（厚度：5~10μm ）和染色  封片  H-E 染色/ 苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining)  最常用的染色法  苏木精为碱性染料，使细胞核内的染色质和细胞质内的核糖体染成 紫蓝色  伊红为酸性染料，使细胞质和细胞外基质中的成分染成红色  嗜碱性  组织结构（酸性）对于碱性染料亲和力强的性质。嗜碱性结构可被 苏木精染成紫蓝色  嗜酸性  组织结构（碱性）对于酸性染料亲和力强的性质。嗜酸性结构可被 伊红染成红色 目录 光学显微技术  中性  组织结构对于两种染料亲和力都不强的性质，H-E染色着色淡  细胞内的结构  嗜酸：核仁，线粒体，SER，溶酶体 （细胞质、细胞外基质）  嗜碱：染色体，核糖体，RER  中性：高尔基体，中心体 其它切片技术  火棉胶包埋：大的组织，如眼球、睾丸  冰冻切片：保存蛋白  涂片：液态组织结构，如血液、骨髓  铺片：软组织，如神经组织、肠系膜  磨片：坚硬组织，如牙组织、骨组织 其它染色法  硝酸银→神经细胞（黑色）（银染）  醛复红→弹性纤维（紫色）  甲苯胺蓝→肥大细胞（紫红色）（异染性） 目录 电子显微镜技术 光镜的分辨率： 0.2μm 透射电镜术 电镜的分辨率：  电子密度高 0.2nm  当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时，电子被散射得多， 因此，射落在荧光屏上的电子少而呈暗像，电镜照片呈黑色或深灰 色  电子密度低 扫描电镜术  立体感 目录 组织化学术 组织化学术  是应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学原理和技术， 与组织学技术相结合而产生的技术，能在组织切片定性、定位、 定量地显示某种物质的存在与否以及分布状态 细胞化学术(cytochemistry)  上述技术用于游离细胞样品 一般组织化学术  基本原理  在切片上添加某种试剂，和组织中待测反应物发生反应，其终产物 或为有色沉淀，以便用光镜观察；或为重金属沉淀，以便用电镜观 察  举例  糖类：PAS反应(parioedic acid Schiff reaction) （紫红色）  脂类：油红、尼罗蓝及苏丹类染料（防止脂类被溶解）；四氧化锇 （黑色）  核酸：福尔根反应→DNA （紫红色）；甲基蓝、派若宁反应→DNA 绿色，RNA红色 目录